| 查看: 2237 | 回复: 18 | |||
[交流]
蛋白质 电泳 活性？
|
|||
| 利用电泳法测蛋白质 的组成及含量，跑电泳时需要保证蛋白质的活性吗 |
回复此楼» 猜你喜欢
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有201人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白活性问题
已经有7人回复
- 了解蛋白质性质及其熟悉电泳的高手请进！
已经有11人回复
- 蛋白质活性电泳中目的蛋白的回收
已经有5人回复
- 硫酸沉淀一定是蛋白质吗？
已经有4人回复
- 毕赤酵母表达的蛋白无活性
已经有8人回复
- DH5α能否表达外源蛋白
已经有15人回复
- 电泳 蛋白 DNA
已经有8人回复
- 【资料】做好电泳的关键技术及问题总结
已经有27人回复
- 【求助/交流】线粒体的提取及活性检测
已经有8人回复
- 【求助/交流】请问用RIPA裂解液裂解后的蛋白能做ELISA吗？
已经有6人回复
- 【原创】非变性凝胶电泳原理及应用实例
已经有48人回复
- 【求助】从细胞中提取的线粒体还能保持原有的生理活性吗？
已经有10人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
虚位以待，共探前沿：热烈欢迎报考北京工业大学纳米多孔材料课题组2026级博士研究生
+1/261
-
双一流南京医科大学招计算机、AI、统计、生物信息等方向26年9月入学博士
+1/182
-
接样SEM/XPS/XRD/FTIR/BET等多种测试/提供预存服务
+1/86
-
上海海洋大学与中国水产科学研究院 联合培养 学术型研究生 食品科学与工程专业
+1/81
-
天津大学化学系吴立朋课题组申请考核制博士招生/博后招聘
+1/80
-
天津大学化学系吴立朋课题组申请考核制博士招生/博后招聘
+1/79
-
中国科学院山西煤炭化学研究所水污染防治与资源化利用方向招本科/硕士线上实习生
+1/78
-
宁波大学招聘科研助理1-2名
+1/52
-
Analytical Science Advances（Wiley出版社）长期征稿中...
+1/37
-
江西师范大学化学与材料学院2026年博士研究生招生
+1/30
-
天津大学化学系吴立朋课题组申请考核制博士招生/博后招聘-有机化学，金属有机
+1/22
-
天津大学化学系吴立朋课题组申请考核制博士招生/博后招聘-有机化学，金属有机
+1/21
-
澳门科技大学药学院诚招2026年秋季药剂学/生物材料方向博士研究生
+1/10
-
肿瘤免疫课题组招聘 博后
+1/10
-
天津大学化学系吴立朋课题组申请考核制博士招生/博后招聘
+1/10
-
中南大学化学化工学院高性能聚合物团队2026年诚聘博士后或青年教师
+1/8
-
Ei 期刊青年编委招募（工程设计方向）
+1/8
-
中国地质大学（武汉）戴志高课题组诚招2026级硕博研究生
+1/5
-
浙江大学徐腾飞研究员招聘环境污染与健康、组学分析、生信、模拟计算等背景博士后
+1/3
-
西交利物浦大学/GaN电力电子器件方向/张洁老师招博士研究生
+1/3
12楼2012-04-28 08:25:36
★ ★ ★
殷灿灿(金币+3): 谢谢参与
树树8013: 回帖置顶 2012-04-29 12:05:18
树树8013: 金币+2, 谢谢耐心交流，欢迎常关注食品板块。 2012-04-29 12:05:50
殷灿灿(金币+3): 谢谢参与
树树8013: 回帖置顶 2012-04-29 12:05:18
树树8013: 金币+2, 谢谢耐心交流，欢迎常关注食品板块。 2012-04-29 12:05:50
|
不需要，也不容易保证蛋白质的活性。保证蛋白质的活性要保证蛋白质有正确的二级结构，高温、变性剂等因素很容易破坏蛋白质的二级结构，电泳放热容易使局部温度过高。更何况通常会故意让蛋白质变性，例如SDS-PAGE。 SDS-PAGE分离蛋白质要用SDS处理，使蛋白质形成带大量负电荷的长棒状分子，还原法SDS-PAGE还要用二硫苏糖醇（DTT）之类的还原剂把二硫键还原成巯基。这样做的目的是使蛋白质在电泳中按照分子量大小分离开，而不必考虑蛋白质原有的构型。如果是组成比较简单的蛋白质样品，与样品在同一张胶上同时跑一组蛋白质分子量标准，然后对电泳后的凝胶进行考马斯亮蓝染色，用分析软件分析条带浓度就可以了，但只是知道某种蛋白质含量的相对情况，不是准确定量。如果是组成比较复杂的蛋白质样品，可能还要转膜进行Western-Blotting，甚至有的会需要进行双向电泳。步骤中很多变性因素的。  除非有必要保留生物活性样品，可以用非变性电泳，注意操作条件。但这样的情况，电泳时蛋白质条带位置的影响因素会比较多。 [ Last edited by dodogougou on 2012-4-28 at 09:54 ] |
15楼2012-04-28 09:32:44
殷灿灿2楼2012-04-27 21:21:20
3楼2012-04-27 21:29:39
7楼2012-04-27 22:39:24
8楼2012-04-27 22:50:26
9楼2012-04-27 22:56:37
10楼2012-04-27 23:09:56
11楼2012-04-27 23:35:01
13楼2012-04-28 08:52:04
16楼2012-04-28 09:57:06
17楼2012-04-28 11:31:57
18楼2012-04-28 13:11:45
19楼2012-04-28 17:09:21
简单回复
2012-04-27 22:11
回复
殷灿灿(金币+3): 谢谢参与
守着风儿5楼
2012-04-27 22:34
回复
殷灿灿(金币+3): 谢谢参与
2012-04-27 22:38
回复
殷灿灿(金币+3): 谢谢参与
假大空14楼
2012-04-28 09:00
回复
殷灿灿(金币+3): 谢谢参与
祝福