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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE和PAGE的区别（SDS-PAGE测出来的一定就是蛋白质相对分子质量？）
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weizhenx

禁虫 (小有名气)
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1楼 2011-11-30 21:11:13
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回帖置顶 ( 共有2个 )

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+3, BioEPI+1): 可行 2011-12-02 12:02:35
以前好多同源多亚基蛋白就是这样得到的：SDS看条带数，若是单挑带，再作非SDS，根据两者的分子量比值确定亚基数
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13楼2011-12-01 20:46:42
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xingnian0925

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+3, BioEPI+1): 谢谢参与 2011-12-02 12:03:13
做过非变性电泳，即上样缓冲液中不加巯基乙醇，加入碘乙酰胺，这样二硫键就不会打开了。
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15楼2011-12-02 09:27:35
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普通回帖

mqs123

金虫 (初入文坛)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
weizhenx(金币+1): 2011-12-02 11:02:31
是不是可以做下Western Blot 提高分辨率。
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2楼2011-11-30 23:16:35
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jakelly

金虫 (著名写手)
weizhenx(金币+1): 2011-12-02 11:02:57
他说的有一定道理，可以考虑用其它辅助手段来鉴定该蛋白的相对分子质量。
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4楼2011-12-01 00:05:18
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leimiao_hit

木虫之王 (文学泰斗)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
weizhenx(金币+1): 2011-12-02 11:03:11
做下Western Blot 不错，可以试试
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5楼2011-12-01 00:19:13
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yang0071

木虫 (职业作家)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
weizhenx(金币+1): 2011-12-02 11:03:17
老师是对的
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6楼2011-12-01 08:57:13
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xzhiqiang

禁虫 (正式写手)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
weizhenx(金币+1): 2011-12-02 11:03:22
本帖内容被屏蔽
7楼2011-12-01 09:13:35
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jingyu501

禁虫 (正式写手)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
weizhenx(金币+1): 2011-12-02 11:03:26
本帖内容被屏蔽
8楼2011-12-01 09:27:27
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
做个凝胶过滤吧
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10楼2011-12-01 11:44:24
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
变性后各个亚基解离  得到的不是蛋白原始的质量    非变性的才是
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11楼2011-12-01 13:17:26
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ligangpku

金虫 (小有名气)
★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
你可以上网查一下 这种蛋白质是含有几个亚基的  然后乘以倍数就好了，比如avidin应该是68kd  它变形了  就变成了原来的四分之一  大约17kd   所以老师是对的。
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12楼2011-12-01 20:32:04
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toddler

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
weizhenx(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-12-02 12:02:55
要做结合蛋白的总分总量，简单的办法可以考虑用梯度PAGE，天然胶，不加变性剂
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14楼2011-12-02 09:00:51
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xingnian0925

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by xingnian0925 at 2011-12-02 09:27:35:
做过非变性电泳，即上样缓冲液中不加巯基乙醇，加入碘乙酰胺，这样二硫键就不会打开了。

抱歉 是非还原的电泳，
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16楼2011-12-02 09:29:12
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小兵pp

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
...你不加巯基乙醇不就得了？
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17楼2011-12-02 11:46:12
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枫叶留殇

新虫 (正式写手)
是不是打个质谱呢？？
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18楼2012-07-07 14:19:18
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jakelly3楼
2011-12-01 00:04  
weizhenx(金币+1):谢谢参与
clarktao9楼
2011-12-01 09:42  
weizhenx(金币+1):谢谢参与
linyingjia(金币-1): 2011-12-01 13:16:48
weizhenx(金币+1): 2011-12-02 11:03:32
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