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350784478

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】细胞核内蛋白和细胞浆蛋白提取有什么区别?

最近要提取细胞核内蛋白,我看网上基本上都是介绍细胞浆内蛋白的提取方法,而且也是大同小异,那细胞核内蛋白的提取方法有何讲究以及需要注意的地方吗?
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zhandeguo1

银虫 (小有名气)


蛋白

350784478(金币+1):如果使用的裂解液和细胞质蛋白的裂解液一样,但是再辅以超声波,效果是否会好很多呢? 2010-11-09 09:20:36
裂解液的强度不同,细胞质蛋白的盐离子浓度一般150左右,裂解核时要450左右。
2楼2010-11-09 09:14:21
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zhandeguo1

银虫 (小有名气)


是的。蛮有经验的嘛!
3楼2010-11-10 13:18:42
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xhjggl

木虫 (正式写手)


上海生工有此试剂 021-37772436

细胞核蛋白/浆蛋白抽提试剂盒
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit       
产品说明:本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和胞质蛋白,提取制备过程简便。制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性,并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究,可以每次从1×107个培养细胞或200mg 组织中提取所需要的蛋白质,可以使用50次。储存条件:2-~8℃。
产品特点:
1.最大限度保持蛋白质活性,可以用于EMSA,Pull down,Enzyme activity assay等实验;
2.整个操作过程只需要一个小时左右;
3.即可以用于培养细胞(50x107个),有可以用于动物组织(50x200mg)蛋白质的提取;
4.避免蛋白酶对蛋白质的降解,保持蛋白质的完整性和天然活性;
5.可以同时处理多个样品。
编号        包装        价格        产地
BSP001        50 Assays        480        生工

细胞核蛋白质提取试剂盒
Nucleoprotein Protein Extraction Kit       
产品说明:本试剂盒提供独特的组份,采用特殊的非离子型去污剂,以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂,能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞,经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白,释放的细胞核能够保持完整,再用Lysis Buffer对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性,因此该产品可合适用于SDS-PAGE电泳、Western Blot、免疫共沉淀,EMSA,Pull Down, 转录调控等后续蛋白质或分子生物学相关实验的研究,每次可以从107个培养细胞或200mg动物组织提取核蛋白质,本试剂盒可以使用50次。储存条件:2-~8℃
产品特点:
1.提取的核蛋白质可以最大限度的保持蛋白质的活性,可以用于EMSA,转录因子分析的实验;
2.可以从50x107个培养细胞或50x200mg动物组织提取核蛋白;
3.整个实验过程只需要45分钟左右;
4.在提取的过程中,最大限度的减少了膜和胞质蛋白对核蛋白的污染;
5.不需要超速度离心,可以同时处理多个样品。
编号        包装        价格        产地
BSP009        50 Assays        300        生工
4楼2010-11-18 21:59:43
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zx1984

木虫 (正式写手)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是单纯做实验还是建议用试剂盒,方便,效率也比较高,最主要是节省时间。
5楼2012-12-27 10:01:36
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