应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 40KD,39KD蛋白，SDS-PAGE如何分离，胶浓度？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 2671  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

youngsun50

木虫 (正式写手)

[求助] 40KD,39KD蛋白，SDS-PAGE如何分离，胶浓度？

如题，我现在有两个蛋白条带，各大约40kD,39kD,用12%胶分离快挤一块了，想切胶扣带进行下步质谱分析，但不放心，想分的更开点，今天刚试了15%胶更不行。电泳条件均为先80v（5%积层胶），后150V。
请问，要用多少浓度的胶分呢，10%or更低的？太低会不会煮胶染色时破裂？或者，电泳条件有什么需要改变的？
谢谢

[ Last edited by youngsun50 on 2013-3-18 at 22:37 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
学会感恩，强大自我
1楼 2013-03-18 22:30:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2013-03-19 08:34:17
youngsun50: 金币+5 2013-03-19 15:25:25
如果12%的胶分不开的话，不改变胶的性质而只变变浓度想分开有一定难度。10%或者8%的胶你可以试试，电泳时间尽量长一些。还可以试试加尿素，这个只对有些蛋白有效果。实在不行的话做双向电泳分。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-19 07:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youngsun50

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-19 07:03:02
如果12%的胶分不开的话，不改变胶的性质而只变变浓度想分开有一定难度。10%或者8%的胶你可以试试，电泳时间尽量长一些。还可以试试加尿素，这个只对有些蛋白有效果。实在不行的话做双向电泳分。

谢谢，请问8%的胶会不会太脆弱？因为我的染色是快速的，需要煮沸
赞一下 回复此楼
学会感恩，强大自我
3楼2013-03-19 08:01:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by youngsun50 at 2013-03-19 08:01:31
谢谢，请问8%的胶会不会太脆弱？因为我的染色是快速的，需要煮沸...

我没有试过煮沸的方法。胶浓度小的话会比较软，我觉得应该没事。祝好运。
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-19 13:11:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youngsun50

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-19 13:11:01
我没有试过煮沸的方法。胶浓度小的话会比较软，我觉得应该没事。祝好运。...

谢谢了，我用10％的刚好分开

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
学会感恩，强大自我
5楼2013-03-19 15:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
聚丙烯酰胺凝胶浓度与蛋白质分离范围的关系：
聚丙烯酰胺凝胶浓度/%           蛋白质分离范围/kd
5                                36—200
7.5                              24—200
10                               14—200
12.5                              14—100
15                                14—60
浓缩胶浓度低；分离胶浓度高于浓缩胶，一般不小于5%。

参考：吕宪禹 主编，蛋白质纯化实验方案与应用，化学工业出版社，2010，第168页。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-07-14 12:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youngsun50

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-07-14 12:20:35
聚丙烯酰胺凝胶浓度与蛋白质分离范围的关系：
聚丙烯酰胺凝胶浓度/%           蛋白质分离范围/kd
5                                36—200
7.5                              24—200
10                ...

谢谢，已解决，用的10％分离的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
学会感恩，强大自我
7楼2013-07-16 21:13:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhw622

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by youngsun50 at 2013-07-16 21:13:15
谢谢，已解决，用的10％分离的
...

楼主当时用的是什么电压，多长时间跑的？我也正好遇到35KD 左右需要分开的蛋白。谢谢！
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2014-04-06 20:24:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 youngsun50 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602调剂 初试总分335 +9 19123253302 2026-04-05 9/450 2026-04-06 06:14 by houyaoxu
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +17 吃的不少 2026-04-05 20/1000 2026-04-06 00:32 by T可可西里T
[考研] 化学调剂 +16 艾志恒 2026-04-03 17/850 2026-04-06 00:27 by 永字号
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-05 8/400 2026-04-05 21:20 by 学员8dgXkO
[考研] 283求调剂 +5 baiiyu 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:35 by 啵啵啵0119
[考研] 考研调剂生寻找导师 +3 顾瞻考研啊 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:18 by 啵啵啵0119
[考研] 298求调剂 +3 manman511 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:09 by kk112233
[考研] 282求调剂 +3 aaa车辆 2026-04-01 3/150 2026-04-05 17:03 by yulian1987
[考研] 341求调剂 +3 学无止境，冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 08工科，295，接受跨专业调剂 +8 lmnlzy 2026-03-30 8/400 2026-04-03 13:08 by nalakaiqi
[考研] 调剂 +7 祉岷. 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:11 by 花呗还欠600
[考研] 一志愿武汉理工0856，初试334 +3 26考研材料 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:22 by dongzh2009
[考研] 一志愿北京科技，085601总分305求调剂 +9 半生瓜！ 2026-04-01 11/550 2026-04-02 08:28 by Wang200018
[考博] 26年申博 +3 staryer 2026-03-30 4/200 2026-04-01 23:21 by ai4pharm
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 265求调剂 +11 yelck 2026-04-01 12/600 2026-04-01 19:12 by 549790059
[考研] 350求调剂 +7 阿佳～ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 18:43 by 6266jl
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭