24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3471  |  回复: 7

tzaixmc

木虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE蛋白电泳同一蛋白不同loading buffer条带不一样 已有1人参与

如题,我跑SDS-PAGE时,一个蛋白样品用商品化的SDS-PAGE loading buffer,煮沸5min后电泳条带大小为50kD左右,但是同一蛋白样品用Native PAGE loading buffer(即pH6.8的Tris-HCl和甘油配置)跑SDS-PAGE时电泳条带在20KD左右,很纳闷为什么会出现这样的情况啊。高手出来解释解释吧,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能蛋白质没有完全变性。
2楼2012-07-31 22:08:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请检查这个两个BUFFER的PH是否一致,然后提高变性时间到15分钟再看。
3楼2012-07-31 22:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
native loading buffer可能是蛋白质形成4聚体造成的。
4楼2012-08-01 03:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
native page和SDS page不一样吧,怎么能用native page的上样buffer跑SDS page呢?
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
5楼2012-08-01 09:23:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dabinyang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-02 15:27:40
楼主,native 的buffer里是不含dtt、sds或者巯基乙醇的,没有改变蛋白的构象,而sds-page里蛋白的构象经过变性已经是橄榄型的,跑出来当然不一样了。
younevertry,youneverknow~
6楼2012-08-01 21:27:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tzaixmc

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dabinyang at 2012-08-01 21:27:55
楼主,native 的buffer里是不含dtt、sds或者巯基乙醇的,没有改变蛋白的构象,而sds-page里蛋白的构象经过变性已经是橄榄型的,跑出来当然不一样了。

但是缓冲液,胶里面有SDS啊.我只是不还原蛋白啊
7楼2012-08-02 08:53:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

speedgy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主,你应该只把2-mercaptoethanol去掉就好了,不可以去掉sds
8楼2015-07-03 15:28:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tzaixmc 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂 +7 春日来信- 2026-04-03 7/350 2026-04-05 12:50 by Hdyxbekcb
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +8 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-04 8/400 2026-04-05 12:15 by ujn_zhuj
[考研] 085410人工智能 初试316分 求调剂 +6 残星拂曙 2026-03-31 6/300 2026-04-05 12:15 by rainbow11
[考研] 359求调剂22408 +3 123456789qw 2026-03-31 3/150 2026-04-05 10:09 by zhq0425
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +10 梁富贵险中求 2026-04-04 12/600 2026-04-05 09:37 by guoweigw
[考研] 求生物学调剂 +14 15172915737 2026-04-01 14/700 2026-04-04 20:13 by babysonlkd
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南农090401,268,求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +6 加一一九 2026-03-31 6/300 2026-04-04 14:57 by 聪明的大松鼠
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊!
[考研] 366求调剂 +7 sbdnd 2026-04-03 7/350 2026-04-03 12:40 by cymywx
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 303求调剂 +3 一色清羽 2026-04-02 4/200 2026-04-03 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-02 11:31 by lnilvy
[考研] 261求B区调剂 +5 明仔· 2026-04-01 7/350 2026-04-02 11:17 by 邹尉尉
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
[考研] 食品学硕362求调剂 +3 xuanxianxian 2026-04-01 3/150 2026-04-01 21:05 by 啊李999
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +25 lllllos 2026-03-30 26/1300 2026-04-01 09:52 by 一只好果子?
信息提示
请填处理意见