24小时热门版块排行榜    

查看: 3785  |  回复: 7

tzaixmc

木虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE蛋白电泳同一蛋白不同loading buffer条带不一样 已有1人参与

如题,我跑SDS-PAGE时,一个蛋白样品用商品化的SDS-PAGE loading buffer,煮沸5min后电泳条带大小为50kD左右,但是同一蛋白样品用Native PAGE loading buffer(即pH6.8的Tris-HCl和甘油配置)跑SDS-PAGE时电泳条带在20KD左右,很纳闷为什么会出现这样的情况啊。高手出来解释解释吧,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能蛋白质没有完全变性。
2楼2012-07-31 22:08:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请检查这个两个BUFFER的PH是否一致,然后提高变性时间到15分钟再看。
3楼2012-07-31 22:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
native loading buffer可能是蛋白质形成4聚体造成的。
4楼2012-08-01 03:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
native page和SDS page不一样吧,怎么能用native page的上样buffer跑SDS page呢?
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
5楼2012-08-01 09:23:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dabinyang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-02 15:27:40
楼主,native 的buffer里是不含dtt、sds或者巯基乙醇的,没有改变蛋白的构象,而sds-page里蛋白的构象经过变性已经是橄榄型的,跑出来当然不一样了。
younevertry,youneverknow~
6楼2012-08-01 21:27:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tzaixmc

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dabinyang at 2012-08-01 21:27:55
楼主,native 的buffer里是不含dtt、sds或者巯基乙醇的,没有改变蛋白的构象,而sds-page里蛋白的构象经过变性已经是橄榄型的,跑出来当然不一样了。

但是缓冲液,胶里面有SDS啊.我只是不还原蛋白啊
7楼2012-08-02 08:53:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

speedgy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主,你应该只把2-mercaptoethanol去掉就好了,不可以去掉sds
8楼2015-07-03 15:28:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tzaixmc 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 18/900 2026-08-24 12:03 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +12 kulium 2026-08-21 15/750 2026-08-24 12:02 by iaeyuan
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见