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tzaixmc

木虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE蛋白电泳同一蛋白不同loading buffer条带不一样已有1人参与

如题,我跑SDS-PAGE时,一个蛋白样品用商品化的SDS-PAGE loading buffer,煮沸5min后电泳条带大小为50kD左右,但是同一蛋白样品用Native PAGE loading buffer(即pH6.8的Tris-HCl和甘油配置)跑SDS-PAGE时电泳条带在20KD左右,很纳闷为什么会出现这样的情况啊。高手出来解释解释吧,谢谢!
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
native page和SDS page不一样吧,怎么能用native page的上样buffer跑SDS page呢?
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
5楼2012-08-01 09:23:05
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能蛋白质没有完全变性。
2楼2012-07-31 22:08:37
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请检查这个两个BUFFER的PH是否一致,然后提高变性时间到15分钟再看。
3楼2012-07-31 22:22:55
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
native loading buffer可能是蛋白质形成4聚体造成的。
4楼2012-08-01 03:34:11
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