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gandanly金虫 (小有名气)
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[求助]
SDS-PAGE浓缩胶不能压成一条线，速度特别的慢，要2个小时
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| 前一段时间跑胶还是正常的，我用的是大板跑胶，恒流40ma，以前我都是3.5小时全部结束的。但是，目前的问题是loading buffer在SDS-PAGE浓缩胶不能压成一条线，感觉是散开的，成一片了，Maker在浓缩胶的时候就可以看出来是分开的，很多条细小的带，同时在浓缩胶的时候速度特别的慢，要2个小时多（以前也就半小时），最近我配了电泳缓冲液，Tris-Glycine-SDS, 调到pH 8.3了（用NaOH或HCl调的）。我测了没有问题，别人配了浓缩胶30.8，他说也没有问题的。电泳进入到分离胶之后过一段时间loading buffer就又成为一条线，最后目标蛋白也能做出来，但是没有以前好。但是电泳比以前多了2-3小时。请教哪位高手给我点拨一下。我用的是Bio-rad的电泳系统，比较老了，但是前一个月做的还不错的，现在就悲催了啊！ |
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我跑10%的分离胶 5%浓缩胶。。。浓缩胶要2小时多。。分离胶也要2小时 条带都很正常4楼2011-07-24 21:24:25
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