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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 谁给我讲一下SDS-PAGE浓缩胶的作用
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皇马铁卫

铜虫 (正式写手)

[求助] 谁给我讲一下SDS-PAGE浓缩胶的作用

SDS-PAGE中浓缩胶具体原理是什么啊？哪位童鞋给我讲讲~
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【分子生物】EPI帖 蛋白质生物学

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春晓赏花，夏日听蝉，箫吹秋月，酒饮冬霜~
1楼 2011-10-13 20:07:33
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

皇马铁卫(金币+2): 谢谢 2011-10-13 21:48:14
我觉得是因为浓缩胶浓度较小，在跑浓缩胶的时候，电压又比跑分离胶的时候小，蛋白可以差不多一起跑到同一条水平线上，并进入分离胶。
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2楼2011-10-13 21:12:59
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
皇马铁卫(金币+3): 谢谢 2011-10-13 21:48:18
wanhscn(金币+2): Good！ 2011-10-14 00:16:21
西瓜(金币+3, MolEPI+1): Good! 2011-11-02 01:52:40
大致是以下情况：浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压递度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
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3楼2011-10-13 21:19:33
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皇马铁卫

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-13 21:19:33:
大致是以下情况：浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较 ...

再问一下，为什么跑DNA不要浓缩胶？谢谢～
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春晓赏花，夏日听蝉，箫吹秋月，酒饮冬霜~
4楼2011-10-13 21:56:15
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asznpb

木虫 (正式写手)
★
wanhscn(金币+1): 不急，慢慢解释！ 2011-10-14 00:17:54
……胶的形状，加样孔的位置，电泳的模式……我知道你又该问为什么蛋白质电泳不能和核酸电泳一样了……
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显微镜下的世界很精彩！
5楼2011-10-13 23:15:26
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doublehelix

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 皇马铁卫 at 2011-10-13 21:56:15:
再问一下，为什么跑DNA不要浓缩胶？谢谢～

没必要呀，呵呵，琼脂糖跑电泳直接根据样品分子大小来分离，效果很好呀
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6楼2011-10-14 09:59:34
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vanvan

木虫 (小有名气)
作用是使样品进入分离胶前被浓缩成狭窄的扁盘，从而提高分离效果
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机遇与挑战并存,梦想与困难共生
7楼2011-10-14 21:39:38
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