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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平已有38人参与


如上图所示，分离胶凝固后，把水层倒掉，发现胶面不是以前那种很直的一条水平线，而是弯弯曲曲的，而且分离胶的底部有一小段老是凝不上，从制胶架上取下后底部那段直接流下来，就是液体，所有的储备液都重新配了，APS也是现配的，也混匀了，可还是老样子，都重复N多次了，也不知道是什么原因，一样的操作，想想以前也没有遇到过这种问题，只犯晕，大家有碰到这种现象啊？
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Betterlatethannever
1楼2010-09-16 18:47:19
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

huangli123

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+3):谢谢新虫分享，欢迎常来生物版 2010-09-26 12:33:53
这个我觉得有必要回复一下，因为我最近也遇到过这个情况，而且实验室只有我出现这个情况，比你的夸张，我的都成锯齿状了，后来我发现，加TEMED后，混匀的时候不要太长，差不多混好了就加进去就不会出现这个情况。
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35楼2010-09-25 20:55:32
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普通回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):也许 2010-09-26 10:43:49
是不是实验室温度太高啊，看样子是胶凝的不够啊，多等一段时间试试
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2楼2010-09-16 19:18:41
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zhyzx

金虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1):我一直水封 改下试试 2010-09-26 10:44:10
建议你不用水封了，改用无水乙醇试试
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3楼2010-09-16 20:14:11
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-09-16 19:18:41:
是不是实验室温度太高啊，看样子是胶凝的不够啊，多等一段时间试试

应该不是温度的原因，按说温度高点胶凝的更快点，再说实验室开着空调呢，以前这样做也没碰到什么问题，至于时间凝了一个多小时，也不短了
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Betterlatethannever
4楼2010-09-16 21:24:59
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhyzx at 2010-09-16 20:14:11:
建议你不用水封了，改用无水乙醇试试

哦，主要是以前一直用水封，从来没发现什么问题，所以想应该不是这个原因
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Betterlatethannever
5楼2010-09-16 21:26:49
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
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silicare(金币+1):有这可能 2010-09-26 08:36:27
也有可能是凝得太快了，没来得及用水压平就凝了，原因是温度太高（会不会是你的胶板刚从烘箱中烘干就立刻灌胶了）。以前就遇到过这种情况。压平用异丙醇最好。
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Thank-you，so-blue.
6楼2010-09-16 21:29:17
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孤魂野鬼

金虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1):要鼓励 2010-09-26 10:44:25
小虫觉得你是不是没把板擦干净呀，还有就是是不是你的APS太浓了，呵呵  我做的SDS-PAGE试验不多，若果觉得我的意见很没水平 别见怪呀！
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如果你知道去哪，全世界都会为你让路！~
7楼2010-09-16 21:43:50
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ypt86

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):也许 2010-09-26 10:44:39
浓缩胶配完之后，不要用滤纸去吸水，因为加水之后和胶形成一层膜。如果用滤纸吸水就会破坏水膜，造成胶面不平整。
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8楼2010-09-16 22:17:11
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 孤魂野鬼 at 2010-09-16 21:43:50:
小虫觉得你是不是没把板擦干净呀，还有就是是不是你的APS太浓了，呵呵  我做的SDS-PAGE试验不多，若果觉得我的意见很没水平 别见怪呀！

您过谦了，这两点确实很重要，我也都怀疑过，不过还是不行。
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Betterlatethannever
9楼2010-09-16 23:53:20
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pxmyz

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):漏液？不太像 2010-09-26 10:45:01
从照片上看，楼主的制胶板下面可能出现漏液的情况吧，我做过SDS-PAGE胶，未出现过这种情况。
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Ican，Ido.
10楼2010-09-17 00:08:37
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