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snoopyzxx木虫 (著名写手)
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Tricine-sds-page电泳要怎么跑？帮我分析一下结果啊。
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我用的是nature 的protocol，但是为什么每次跑出来，小分子仍然分不开呢？10KD以下都没有条带。 我用的是16%T、3%C的胶，加或不加尿素我都试过。都一样，10KD以下跑不出条带来。是什么原因？ 注：最小的那个黄色marker是10KD。  130111 Tricine-SDS-PAGE电泳（无尿素）.JPG |
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cicelyzh
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snoopyzxx: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-19 19:27:39
snoopyzxx: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-19 19:27:39
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如果你是在大肠杆菌里诱导表达的话，应该可以诱导出明显的带，不用tricine胶也应该能看到。我觉得你目前正在检测诱导条件，直接上普通的16%胶就可以了。注意不要把前沿跑出去了。当然，Tricine胶的确是分离效果好。只是这样也不知道你的胶的问题在哪里。我觉得是不是有溶液配得不对，检查一下3×gel buffer的pH是否调得正确。Tris加浓盐酸会产热，先调到大概，然后等溶液冷却后再继续调至所需pH。还有就是丙烯酰胺溶液中的丙烯酰胺：甲叉丙烯酰胺比例。我是配成48:15%的stock。 |
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7楼2013-01-20 00:07:47
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