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晓惜凝香

新虫 (初入文坛)

[交流] sds-page蛋白样变性后仍会降解？

SDS-PAGE的蛋白加loadingbuffer煮沸变性后需要-20度保存，我不太明白已经变性了室温为什么还会降解？蛋白酶煮沸的时候不也降解了么？
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1楼2012-03-28 16:24:57
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颜英

铜虫 (小有名气)
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看天: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-28 21:11:06
晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:55:13
无论变性不变性，他都是大分子有机物，有时微生物生长的良好载体
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2楼2012-03-28 18:32:56
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)
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晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:48:48
个人以为一个让蛋白变性并煮沸的环境不会是微生物污染。
以前在书上看到，加热煮沸是加快sds与蛋白结合，常温放置过夜还是多少小时也达到同样结果。按理常温放置不会降解蛋白。
但在实验中，我煮沸并常温放置过，只是电泳效果不好，没发现有降解现象。
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3楼2012-03-29 06:23:08
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ggynzb

铜虫 (小有名气)
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晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:56:27
SDS和蛋白样品结合够市蛋白质变性，一般是不会降解的，楼主检查一下是不是操作步骤出了什么错误导致结果不好呢。
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4楼2012-03-29 07:39:50
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soholj

至尊木虫 (著名写手)
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貌似会降解，反正放常温不好
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5楼2012-03-29 08:13:55
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wen1023tao

铜虫 (小有名气)
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我做实验煮沸后在常温放了一个多星期，再次点样看没发现降解~~
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6楼2012-03-29 13:16:02
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谢铮

至尊木虫 (著名写手)
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晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:55:50
我发现过降解情况，当时也很奇怪。我现在认为是因为氨基酸解离了。。。
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7楼2012-03-29 20:27:52
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谢铮

至尊木虫 (著名写手)
当然我的样品在-20保存了很长一段时间，不是短期的。
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8楼2012-03-29 20:28:40
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xiezhenrong

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晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:55:58
做过前面一次变性蛋白质电泳上样没上完的常温放置过几天再跑没发现降解
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9楼2012-03-30 20:04:22
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