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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » sds-page蛋白样变性后仍会降解？
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晓惜凝香

新虫 (初入文坛)

[交流] sds-page蛋白样变性后仍会降解？

SDS-PAGE的蛋白加loadingbuffer煮沸变性后需要-20度保存，我不太明白已经变性了室温为什么还会降解？蛋白酶煮沸的时候不也降解了么？
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1楼 2012-03-28 16:24:57
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谢铮

至尊木虫 (著名写手)
当然我的样品在-20保存了很长一段时间，不是短期的。
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8楼2012-03-29 20:28:40
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颜英

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
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看天: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-28 21:11:06
晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:55:13
无论变性不变性，他都是大分子有机物，有时微生物生长的良好载体
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2楼2012-03-28 18:32:56
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
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晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:48:48
个人以为一个让蛋白变性并煮沸的环境不会是微生物污染。
以前在书上看到，加热煮沸是加快sds与蛋白结合，常温放置过夜还是多少小时也达到同样结果。按理常温放置不会降解蛋白。
但在实验中，我煮沸并常温放置过，只是电泳效果不好，没发现有降解现象。
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3楼2012-03-29 06:23:08
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ggynzb

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
晓惜凝香: 金币+1 2012-04-05 20:56:27
SDS和蛋白样品结合够市蛋白质变性，一般是不会降解的，楼主检查一下是不是操作步骤出了什么错误导致结果不好呢。
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4楼2012-03-29 07:39:50
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