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msms

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白SDS-PAGE 下面 老是跑不出来,请各位前辈帮我看看 已有4人参与

最下面的条带有点弥散,最郁闷的是最下面有一条长长的横线,不知道是什么,貌似还有条带在里面,分不出来,请各位前辈帮我看看,能怎么解决,我都急死了。
蛋白SDS-PAGE 下面 老是跑不出来,请各位前辈帮我看看
wy2013-11-27 20hr 07min_副本.jpg
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msms

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-03 02:20:16
SDS-PAGE下面本来分辨率就会变差,你的胶算不错的了。你说的最下面的线应该是指示剂前沿,有小蛋白在那附近也正常。如果你想提高小蛋白的分辨率,可以用高浓度的胶或者跑梯度胶。实在不行可以跑Tricine胶。

嗯,我也打算用tricine试试,谢谢啦
10楼2013-12-05 10:26:15
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查看全部 27 个回答

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-02 16:33:19
这算是跑的挺清楚的了,解决方法:1.加大分离胶浓度;2.减少电泳时间;不知道你的目的产物有多大,通常不会看到那么小的片段吧。就图上看倒数第二个样本与其他样本有较明显区别。
金币是赌出来的
2楼2013-12-02 16:23:23
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-08 20:40:17
SDS-PAGE下面本来分辨率就会变差,你的胶算不错的了。你说的最下面的线应该是指示剂前沿,有小蛋白在那附近也正常。如果你想提高小蛋白的分辨率,可以用高浓度的胶或者跑梯度胶。实在不行可以跑Tricine胶。
3楼2013-12-03 02:20:16
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-08 20:40:24
我们实验室一般用5%的浓缩胶,12%的分离胶。不知你用的是不是,可以试试看。
4楼2013-12-03 08:58:24
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