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qsx04152006

木虫 (知名作家)

[求助] T载体上的目标片段与表达载体连接不上

T载体上的目标片段与表达载体连续两次连接不上,请问大概有哪些原因,双酶切时,T载体上的目标条带很弱,紫外灯下可见,是不是回收后,基本上没有目标条带,所以连接不上。另外,我的双酶切体系,是50微升,内切酶各2微升,载体各10微升;连接体系为,20微升,2Xligase buffer:2微升,T4:2微升,目标条带:14.5微升,表达载体:1.5微升.
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
qsx04152006: 金币+1, 有帮助 2013-10-18 12:06:04
l连接体系中2Xligase buffer:2微升?2X不得10微升吗?
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
2楼2013-10-18 11:09:58
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