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小丫依依

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR片段与载体连接不上

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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
片段大小?载体类型?连接条件?请说明你的具体信息,否则其他人无法发表意见哈
2楼2012-09-14 13:53:24
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merryyiyi

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 热心的虫虫 2012-09-14 16:27:35
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2012-09-14 13:53:24
片段大小?载体类型?连接条件?请说明你的具体信息,否则其他人无法发表意见哈

同意楼上的意见,对于PCR产物克隆连接的问题,有很多的影响因素,例如感受态细胞的活性,PCR产物的浓度,大小等等,你需要告知实验操作的信息,以及问题的具体现象,有无异常情况?
3楼2012-09-14 13:59:31
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丫依依: 金币+2, ★有帮助 2012-09-17 09:39:50
楼主条件都不给……我们怎么帮你分析的……
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-09-17 09:05:14
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小丫依依

新虫 (初入文坛)

我的目的片段大小为1400bp,质粒为pHY300PLK,酶切位点为XbaI和EcoRI
5楼2012-09-17 09:39:33
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小丫依依

新虫 (初入文坛)

PCR体系为50ul,得到的全部用来酶切连接了
6楼2012-09-17 09:41:30
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小丫依依

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2012-09-14 13:53:24
片段大小?载体类型?连接条件?请说明你的具体信息,否则其他人无法发表意见哈

片段大小为1400bp,载体为pHY300PLK,连接体系是10ul,16摄氏度
7楼2012-09-17 09:43:11
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