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小丫依依

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR片段与载体连接不上

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1楼 2012-09-14 10:48:09
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
片段大小？载体类型？连接条件？请说明你的具体信息，否则其他人无法发表意见哈
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2楼2012-09-14 13:53:24
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merryyiyi

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 热心的虫虫 2012-09-14 16:27:35
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2012-09-14 13:53:24
片段大小？载体类型？连接条件？请说明你的具体信息，否则其他人无法发表意见哈

同意楼上的意见，对于PCR产物克隆连接的问题，有很多的影响因素，例如感受态细胞的活性，PCR产物的浓度，大小等等，你需要告知实验操作的信息，以及问题的具体现象，有无异常情况？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-09-14 13:59:31
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丫依依: 金币+2, ★有帮助 2012-09-17 09:39:50
楼主条件都不给……我们怎么帮你分析的……
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-09-17 09:05:14
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小丫依依

新虫 (初入文坛)
我的目的片段大小为1400bp，质粒为pHY300PLK,酶切位点为XbaI和EcoRI
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5楼2012-09-17 09:39:33
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小丫依依

新虫 (初入文坛)
PCR体系为50ul，得到的全部用来酶切连接了
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6楼2012-09-17 09:41:30
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小丫依依

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2012-09-14 13:53:24
片段大小？载体类型？连接条件？请说明你的具体信息，否则其他人无法发表意见哈

片段大小为1400bp，载体为pHY300PLK，连接体系是10ul，16摄氏度
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-17 09:43:11
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