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yghboy168

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】哪种T载体可以克隆6kb的片段。 已有7人参与

要克隆一个6kb的片段,用宝生物的PMD19没有成功,希望有经验的大侠指点。
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眼内有尘三界窄,心头无事一床宽!
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小猫三两只

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
试试inventrogen公司的
2楼2010-05-09 19:12:34
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liudeng821111

木虫 (正式写手)

3楼2010-05-09 21:09:20
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lihegang2000

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
克隆一个6kb的片段,用普通的载体成功率很低,我用的invitrogen公司的Topo长片段克隆试剂盒,十次的要3000多,比较贵
4楼2010-05-10 09:19:07
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陈思容

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也要克隆这个片段,酶切后再克隆吧
5楼2010-05-10 10:51:01
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jasco

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
takara的肯定不行
6楼2010-05-10 13:34:13
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zx_0126

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,请问一楼最后是怎么处理的,我最近也在做克隆测序,所有的目的片段都在5k以上,目前还没有找到比较好的方法,先谢谢了

[ Last edited by zx_0126 on 2012-12-9 at 14:23 ]
做一个快乐的女子,一定要快乐,不快乐也要制造快乐,笑容不一定能使世界绽放,却可放松紧绷的胸膛,开心,
7楼2012-12-09 14:20:49
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zx_0126

新虫 (初入文坛)

怎么回事,怎么变成这种语言了
做一个快乐的女子,一定要快乐,不快乐也要制造快乐,笑容不一定能使世界绽放,却可放松紧绷的胸膛,开心,
8楼2012-12-09 14:22:01
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david1008gao

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哎呀,目的片段6Kb都拿到了还犹豫什么呢,酶切处理一下,不如直接连到目标载体上吧,头疼的问题迎刃而解啦!也不用花冤枉钱啦!
9楼2012-12-09 16:20:25
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david1008gao

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1275660楼: Originally posted by david1008gao at 2012-12-09 16:20:25
哎呀,目的片段6Kb都拿到了还犹豫什么呢,酶切处理一下,不如直接连到目标载体上吧,头疼的问题迎刃而解啦!也不用花冤枉钱啦!

我回答的问题不全面,必须在引物上引入合适的酶切位点和保护碱基才能这样做啊!我还是看看其他同学怎么回答的吧!
10楼2012-12-09 16:29:10
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