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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » T载体上的目标片段与表达载体连接不上
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qsx04152006

木虫 (知名作家)

[求助] T载体上的目标片段与表达载体连接不上

T载体上的目标片段与表达载体连续两次连接不上，请问大概有哪些原因，双酶切时，T载体上的目标条带很弱，紫外灯下可见，是不是回收后，基本上没有目标条带，所以连接不上。另外，我的双酶切体系，是50微升，内切酶各2微升，载体各10微升；连接体系为，20微升，2Xligase buffer:2微升，T4：2微升，目标条带：14.5微升，表达载体：1.5微升.
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1楼 2013-10-17 20:09:54
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qsx04152006: 金币+1, ★有帮助 2013-10-18 12:06:04
l连接体系中2Xligase buffer:2微升？2X不得10微升吗？
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
2楼2013-10-18 11:09:58
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