应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因PCR结果图分析
101/1返回列表
查看: 2457  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

风雨山林

金虫 (小有名气)

[交流] 基因PCR结果图分析 已有4人参与

大家好，我最近做试验，基因pcr，出现的图有点奇怪，想咨询一下，我要将提取的质粒基因组与引物pcr，看看我的基因转进去了吗，可是pcr图出现了还多条带，而且不是在下面，还是在上面，帮忙分析一下
基因PCR结果图分析
Administrator 2013-10-10 17hr 00min.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-14 10:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jonathan1983

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-14 11:19:15
不知道你的目的基因是多大？这个图上的一堆亮东西貌似是引物二聚体(⊙o⊙)哦。PCR时模板浓度不宜过高，提出来后建议稀释几十倍再用。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-10-14 10:55:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlwsj2009

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-14 10:55:54
不知道你的目的基因是多大？这个图上的一堆亮东西貌似是引物二聚体(⊙o⊙)哦。PCR时模板浓度不宜过高，提出来后建议稀释几十倍再用。

最好调整一下模板浓度，还有引物的浓度，模板做50,100,倍稀释试一下。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-14 11:16:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雨山林

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-14 10:55:54
不知道你的目的基因是多大？这个图上的一堆亮东西貌似是引物二聚体(⊙o⊙)哦。PCR时模板浓度不宜过高，提出来后建议稀释几十倍再用。

我的基因在700-1000bp左右，应该在marker范围内，模板浓度不高啊
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-16 08:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雨山林

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wlwsj2009 at 2013-10-14 11:16:50
最好调整一下模板浓度，还有引物的浓度，模板做50,100,倍稀释试一下。
...

亮的东西我不需要，我需要1000bp左右的条带，我疑问的是上面的条带是怎么回事，不应该有啊
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-16 08:58:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zr281069

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这果断是二聚体 看 每条点都有害这么亮
赞一下(3人) 回复此楼
人物
6楼2013-10-16 11:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jonathan1983

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-17 10:17:20
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风雨山林 at 2013-10-16 08:50:34
我的基因在700-1000bp左右，应该在marker范围内，模板浓度不高啊...

你说的模板浓度不高，我不知道在什么范围内。一般我提取基因组DNA后先把模板取出部分，稀释50倍左右再当模板。其次，PCR出不来跟Tm关系很大，不清楚你的温度选的多少，一般要低于Tm值5度左右
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2013-10-17 10:15:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风雨山林

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-17 10:15:33
你说的模板浓度不高，我不知道在什么范围内。一般我提取基因组DNA后先把模板取出部分，稀释50倍左右再当模板。其次，PCR出不来跟Tm关系很大，不清楚你的温度选的多少，一般要低于Tm值5度左右...

这是已经摸好的条件，基因已经P出来了，我是想把这个基因转到其他的菌里去，我电转化后把菌提质粒，没看到转进去的基因，看到了上面的条带，所以想问一下上面的条带是什么
赞一下 回复此楼
8楼2013-10-21 20:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jonathan1983

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 风雨山林 at 2013-10-21 20:01:46
这是已经摸好的条件，基因已经P出来了，我是想把这个基因转到其他的菌里去，我电转化后把菌提质粒，没看到转进去的基因，看到了上面的条带，所以想问一下上面的条带是什么...

上面的条带我也不清楚。遇到这种情况我会重新提一次再看看什么结果
赞一下 回复此楼
9楼2013-10-23 11:37:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1106064361

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
其实根据经验，你这应该都是二聚体！
真要是装上去了，质粒PCR会很亮的！
赞一下 回复此楼
10楼2013-10-23 17:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 风雨山林 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:39 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:03 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:51 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:51 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:39 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-18 7/350 2026-09-19 21:03 by 9i7PCSZyMzot
[教师之家] 现代”学阀”该如何界定 +3 iaeyuan 2026-09-19 3/150 2026-09-19 20:52 by 没昵称呀
[基金申请] 国社科系统bug了，是不是要放榜了？ +7 kynobel 2026-09-16 9/450 2026-09-19 14:52 by 接好运婷
[考博] 申博发邮件 +8 Lmengk 2026-09-15 9/450 2026-09-19 09:27 by 中间体超市
[有机交流] 各位大神，目前国内有哪些比较好用的逆合成软件？ 20+3 zapen 2026-09-15 9/450 2026-09-18 18:17 by zapen
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭