应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因组PCR 无结果
51/1返回列表
查看: 937  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

woo_edison

银虫 (小有名气)

[求助] 基因组PCR 无结果

以前提基因组DNA做pcr都work，但最近怎么着也不work了，即使用的以前验证了的引物，我以前的模板作为对照就可以P到东西，这貌似是说我目前的基因组DNA不好，于是我对基因组进行了评估：基因组DNA跑胶只有一条带，nanodrop测试OD260/280=1.9-2.0 OD260/230=2.5。貌似还可以，但为何PCR无结果呢。在此基础上我对模板进行了稀释1/10,1/100和1/1000，还是不能P到东西?请各位高手指点迷津
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-11-29 12:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
woo_edison: 金币+1 2012-11-30 07:53:43
跑胶一条带的话说明没有RNA污染了，虽然260/280有点高。你nanodrop后DNA的浓度多少？PCR模板一般原核生物基因组用10ng，真核用100ng左右。
赞一下 回复此楼
2楼2012-11-30 07:17:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woo_edison

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-30 07:17:10
跑胶一条带的话说明没有RNA污染了，虽然260/280有点高。你nanodrop后DNA的浓度多少？PCR模板一般原核生物基因组用10ng，真核用100ng左右。

用nanodrop测浓度时，是否要稀释呢?
赞一下 回复此楼
3楼2012-11-30 07:53:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woo_edison

银虫 (小有名气)
是酶出问题了
回复此楼
4楼2012-12-01 04:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by woo_edison at 2012-11-30 07:53:35
用nanodrop测浓度时，是否要稀释呢?...

一般直接测不用稀释，除非样品浓度非常高。
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-01 07:57:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 woo_edison 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭