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songwang0516

银虫 (初入文坛)

[求助] 线粒体基因组长PCR相关问题

本人小白,刚开始试验。要做某个昆虫的线粒体基因组,想求助几个问题:
1,提取时用一般的CTAB提取法可以吗?
2,在做PCR之前要不要用特殊的酶切开环状的线粒体呢?
3,PCR引物有什么特殊要求不?
各位大神,先谢了啊!
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西区五号楼

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
为什么没有人回复呢?同问啊?
2楼2012-07-28 10:53:18
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
songwang0516: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-07-29 17:22:11
CTAB法可以的,常规PCR的方法就可以扩增的,引物没啥特殊要求,不用切的,质粒不也是环状的吗?我以前做过的
3楼2012-07-28 21:32:49
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西区五号楼

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-28 21:32:49
CTAB法可以的,常规PCR的方法就可以扩增的,引物没啥特殊要求,不用切的,质粒不也是环状的吗?我以前做过的

谢谢大神及时的回复,小女子心里有底了!谢谢!
4楼2012-07-29 09:35:51
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西区五号楼

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-28 21:32:49
CTAB法可以的,常规PCR的方法就可以扩增的,引物没啥特殊要求,不用切的,质粒不也是环状的吗?我以前做过的

你好,看见你关于线粒体的回答。我想继续咨询一下,线粒体全长做出来之后的分析中,怎样确定各蛋白的位置?及各个蛋白或者tRNA的起始密码子和终止密码子?谢谢!
5楼2013-04-09 11:21:30
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stoni

铜虫 (小有名气)

与同源蛋白序列进行比较;tRNA通过在线软件tRNAscan预测。
6楼2014-12-20 16:06:45
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