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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】环境样品DNA 提取
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lougiven

禁虫 (小有名气)
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1楼 2011-03-30 08:43:39
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hitliutao

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-03-30 11:13:46
模板不纯,杂质太多,做PCR就极有可能无结果.建议跑个argrose gel 再回收一下,或者重新用乙醇沉淀下,最好加一些rna酶,如果还不行的话,就改进提DNA的方法吧
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2楼2011-03-30 10:22:22
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tingspdf

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
直接上试剂盒，手提太不稳定
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3楼2011-03-30 22:41:05
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xukewei

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
直接上FastDNA Spin Kit for Soil或Mobio Soil DNA Isolation Kit，现在都不缺这点钱

[ Last edited by xukewei on 2011-3-30 at 23:40 ]
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Do what you love and love what you do!Do more than you are paid for!
4楼2011-03-30 23:38:03
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-04-03 15:33:46
可能是杂质太多（尤其是腐殖酸），你可以尝试用PVPP及PBS缓冲液进行洗涤前处理。
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5楼2011-03-31 20:26:06
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ureyguo

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
直接上 Mobio Soil DNA Isolation Kit 这个好用。 不差钱，省的钱又不进你腰包
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6楼2011-03-31 22:01:58
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-04-03 15:33:59
里面有腐植酸或者金属离子干扰，应该进一步纯化
还有就是在PCR体系中加一些牛血清蛋白，可以屏蔽一些干扰
但是最好的办法还是优化DNA提取方法
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7楼2011-04-02 16:53:11
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小小木虫8580

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
试剂盒吧，这个是关键，不能省这个钱
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8楼2011-04-03 13:35:50
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fzwish20000

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-10 22:02:53
http://www.ebiotrade.com/newsf/2009-3/2009310163938.htm
看过这篇文章，不需要特殊设备的还是值得推荐
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9楼2011-11-09 17:17:05
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
环境宏基因组DNA即使用最好的试剂盒提出来也会含有很多的杂质的，作PCR模板扩不出来很正常的，里面抑制扩增的东西很多，DNA最好醇沉或切胶回收下，另外PCR时可以添加些辅助剂如BSA之类的，具有一定的效果
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人生百态原为海，看破红尘方为岸！
10楼2011-11-10 20:39:46
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