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A406

新虫 (初入文坛)

[交流] 如果想重复利用提取植物样品DNA的小塑料研磨棒，如何去除DNA？

转基因植物鉴定需提取微量的DNA，植物微量提取DNA用到小的塑料研磨棒，如果想重复利用，为防止污染，如何完全去除DNA?我们是水清洗加酒精清洗，但清洗很难保证完全去除，湿热灭菌好像只能使其变性，使用酶用量多又太贵。大家去除DNA都有什么高招呀？
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1楼 2011-11-22 23:13:59
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zgb1982

木虫 (正式写手)
★ ★
A406(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-11-23 21:03:39
我们实验室用这些，一般清水洗了，干了就能用了或者湿灭一下。不过目前大家都开始用机器提取了。
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2楼2011-11-23 11:39:59
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
A406(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): Good！不过用到DEPC就麻烦好多了…… 2011-11-23 21:04:25
氢氧化钠泡一会，让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE缓冲液中跑2个小时电泳。DNA就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。
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3楼2011-11-23 12:28:16
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A406

新虫 (初入文坛)
我们有大量的转基因苗要鉴定，小塑料棒清水洗了干了再用存在风险，很有可能会出现弱的目的条带，形成交叉污染。我们有机器提取血液DNA的，但没有试过提取植物的，可能是因为样少，需要液氮研磨，机器也不理想。
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4楼2011-11-23 12:34:04
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A406

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-11-23 12:28:16:
氢氧化钠泡一会，让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE缓冲液中跑2个小时电泳。DNA就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。

谢谢 你的方法是比较彻底 但太复杂了 一次性使用相对这么处理还更划算了
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5楼2011-11-23 12:38:03
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mhb828

铁杆木虫 (著名写手)
★
A406(金币+1):谢谢参与
如果你的研磨棒不是塑料的就好了，我的是陶瓷的，我用酒精烧，很方便也很彻底
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6楼2011-11-23 15:58:58
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dmtxbb

金虫 (正式写手)
★
A406(金币+1):谢谢参与
西瓜: 塑料的啊…… 2011-11-23 21:05:05
我觉得洗洗然后冲冲后，用酒精灯稍微烤会，注意别化了，就可以吧，都变性了
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7楼2011-11-23 16:09:37
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vcvcvc

木虫 (著名写手)
★ ★
A406(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-11-23 21:05:27
1% SDS 泡过夜，酒精梯度洗到水里，湿灭。
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8楼2011-11-23 16:12:54
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xiaohaozi9876

铁虫 (小有名气)
★
A406(金币+1):谢谢参与
那些本来就是哟次性的啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2011-11-23 17:05:13
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zgb1982

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-11-23 12:28:16:
氢氧化钠泡一会，让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE缓冲液中跑2个小时电泳。DNA就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。

我们是提拟南芥的，如果只是用来鉴定转基因苗，用机器粗提就可以了，我们实验室也每天都在做转基因苗的鉴定，没什么问题的。用不着液氮。那样工作量太大了，太慢了

[ Last edited by zgb1982 on 2011-11-24 at 10:46 ]
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10楼2011-11-24 10:45:05
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A406

新虫 (初入文坛)
恩 拟南芥是可以不用液氮。
直接取几平方毫米叶子也可以进行PCR 但水稻不行
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11楼2011-11-24 15:54:10
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q307078056

银虫 (正式写手)
★
A406(金币+1):谢谢参与
想立刻用？
用酸浸泡，然后再水冲洗，皆可~
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12楼2011-11-24 16:48:52
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sherry_xuxu

捐助贵宾 (著名写手)
★ ★ ★ ★
A406(金币+1):谢谢参与
西瓜: 金币-5, 屏蔽内容, 广告 2012-06-06 18:56:22
本帖内容被屏蔽
13楼2011-12-12 21:30:50
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盗铃者

新虫 (初入文坛)
★
A406(金币+1): 谢谢参与
亲啊，，你们的塑料研磨棒是从哪里订的呀？？拜托了～～3Q！！！
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14楼2012-06-06 18:30:36
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A406

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 盗铃者 at 2012-06-06 18:30:36
亲啊，，你们的塑料研磨棒是从哪里订的呀？？拜托了～～3Q！！！

网上搜索“DNA提取 研磨棒”就能出来好多。
我们的是采购部门提供的，具体哪买的不清楚
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15楼2013-04-19 10:38:45
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kidluag

金虫 (正式写手)
★
A406(金币+1): 谢谢参与
不知道放入超声波振荡机里用洗衣粉或者洗洁净水振荡一个小时是否可行，要么干脆高温高压灭菌
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16楼2013-05-25 01:15:44
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梅子清酒

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
玻璃棒的话用2%醋酸钠浸泡一会儿，然后用纸巾擦干就可以了，我提拟南芥的时候就是这样的
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17楼2015-03-17 18:47:03
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