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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如果想重复利用提取植物样品DNA的小塑料研磨棒，如何去除DNA？
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A406

新虫 (初入文坛)

[交流] 如果想重复利用提取植物样品DNA的小塑料研磨棒，如何去除DNA？

转基因植物鉴定需提取微量的DNA，植物微量提取DNA用到小的塑料研磨棒，如果想重复利用，为防止污染，如何完全去除DNA?我们是水清洗加酒精清洗，但清洗很难保证完全去除，湿热灭菌好像只能使其变性，使用酶用量多又太贵。大家去除DNA都有什么高招呀？
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1楼 2011-11-22 23:13:59
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A406

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-11-23 12:28:16:
氢氧化钠泡一会，让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE缓冲液中跑2个小时电泳。DNA就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。

谢谢 你的方法是比较彻底 但太复杂了 一次性使用相对这么处理还更划算了
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5楼2011-11-23 12:38:03
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zgb1982

木虫 (正式写手)
★ ★
A406(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-11-23 21:03:39
我们实验室用这些，一般清水洗了，干了就能用了或者湿灭一下。不过目前大家都开始用机器提取了。
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2楼2011-11-23 11:39:59
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
A406(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): Good！不过用到DEPC就麻烦好多了…… 2011-11-23 21:04:25
氢氧化钠泡一会，让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE缓冲液中跑2个小时电泳。DNA就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-11-23 12:28:16
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A406

新虫 (初入文坛)
我们有大量的转基因苗要鉴定，小塑料棒清水洗了干了再用存在风险，很有可能会出现弱的目的条带，形成交叉污染。我们有机器提取血液DNA的，但没有试过提取植物的，可能是因为样少，需要液氮研磨，机器也不理想。
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4楼2011-11-23 12:34:04
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