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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因PCR结果图分析
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风雨山林

金虫 (小有名气)

[交流] 基因PCR结果图分析已有4人参与

大家好，我最近做试验，基因pcr，出现的图有点奇怪，想咨询一下，我要将提取的质粒基因组与引物pcr，看看我的基因转进去了吗，可是pcr图出现了还多条带，而且不是在下面，还是在上面，帮忙分析一下
基因PCR结果图分析
Administrator 2013-10-10 17hr 00min.jpg
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1楼2013-10-14 10:33:02
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风雨山林

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-17 10:15:33
你说的模板浓度不高，我不知道在什么范围内。一般我提取基因组DNA后先把模板取出部分，稀释50倍左右再当模板。其次，PCR出不来跟Tm关系很大，不清楚你的温度选的多少，一般要低于Tm值5度左右...

这是已经摸好的条件，基因已经P出来了，我是想把这个基因转到其他的菌里去，我电转化后把菌提质粒，没看到转进去的基因，看到了上面的条带，所以想问一下上面的条带是什么
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8楼2013-10-21 20:01:46
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-14 11:19:15
不知道你的目的基因是多大？这个图上的一堆亮东西貌似是引物二聚体(⊙o⊙)哦。PCR时模板浓度不宜过高，提出来后建议稀释几十倍再用。
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2楼2013-10-14 10:55:54
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wlwsj2009

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-14 10:55:54
不知道你的目的基因是多大？这个图上的一堆亮东西貌似是引物二聚体(⊙o⊙)哦。PCR时模板浓度不宜过高，提出来后建议稀释几十倍再用。

最好调整一下模板浓度，还有引物的浓度，模板做50,100,倍稀释试一下。

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2013-10-14 11:16:50
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风雨山林

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-14 10:55:54
不知道你的目的基因是多大？这个图上的一堆亮东西貌似是引物二聚体(⊙o⊙)哦。PCR时模板浓度不宜过高，提出来后建议稀释几十倍再用。

我的基因在700-1000bp左右，应该在marker范围内，模板浓度不高啊
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4楼2013-10-16 08:50:34
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