| 查看: 2597 | 回复: 7 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
RT-PCR扩增效率
|
|||
| 我刚开始做RT-PCR，用的是仪器是7500，荧光燃料法，做标线时扩增效率总是在一百十几。求解决方法。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有203人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 选购什么样的RT-PCR试剂盒
已经有6人回复
- QPCR之 扩增效率
已经有8人回复
- QPCR之引物设计(二)
已经有10人回复
- QPCR扩增效率太低
已经有20人回复
- QPCR之 扩增效率
已经有8人回复
- 荧光定量PCR扩增效率低
已经有16人回复
- qPCR的标准曲线成线性很差，扩增效率低，是什么原因
已经有6人回复
- 求高人指点qpcr问题，扩增效率太高！
已经有14人回复
- 荧光定量PCR结果如何处理
已经有12人回复
- 逆转录-pcr图，就解
已经有22人回复
- 进行点突变的pcr，不能扩增出产物
已经有3人回复
- RT-PCR模板问题。
已经有3人回复
- RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
已经有14人回复
- 荧光定量PCR实验技术
已经有15人回复
- 着急！RT-PCR扩增效率低，情况很诡异，求助高手帮忙指点
已经有12人回复
- 请教RT-PCR 扩增问题
已经有8人回复
- 急求解！Pcr循环数问题...
已经有8人回复
- rt-pcr 复孔之间的目的基因表达不均问题
已经有3人回复
- 荧光pcr标准曲线问题
已经有21人回复
- 实时荧光RT-PCR实验的相关问题
已经有8人回复
- 荧光定量扩增效率低怎么办
已经有3人回复
- RT-PCR扩增图和溶解曲线跑成这样
已经有12人回复
- 不解的问题，q-PCR结果分析。
已经有6人回复
- 16srDNA扩增问题，急
已经有18人回复
- 实时定量PCR 数据处理
已经有7人回复
- 【求助/交流】荧光PCR扩增曲线问题
已经有18人回复
项羽1990
金虫 (正式写手)
- 应助: 50 (小学生)
- 金币: 1396.2
- 散金: 33
- 红花: 4
- 帖子: 684
- 在线: 71.8小时
- 虫号: 2407732
- 注册: 2013-04-08
- 性别: GG
- 专业: 药剂学
3楼2013-08-25 14:48:42
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-08-25 12:54:57
4楼2013-08-25 16:39:56
qingyuansw20
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 4
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 382.5
- 散金: 21
- 红花: 3
- 帖子: 217
- 在线: 67.2小时
- 虫号: 1050181
- 注册: 2010-07-01
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dong_yue: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2013-08-25 21:28:19
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-25 22:38:30
感谢参与，应助指数 +1
dong_yue: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2013-08-25 21:28:19
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-25 22:38:30
|
1、楼主做的是qRT-PCR。 2、扩增效率过高，通常是引物引起的，引物使得非特异性条带（不是目的基因）大量产生，机器将这些非特异性条带的信号全部接受了，导致扩增效率过大。 3、qRT-PCR扩增效率正常值为95%-105%。 4、解决办法：更换引物，引物的pcr产物片段控制在200bp-300bp（我记得是，你再查查文献）。 |
5楼2013-08-25 18:41:45
10