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rt-pcr 复孔之间的目的基因表达不均问题
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自己的滋味
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rt-pcr 复孔之间的目的基因表达不均问题
做了多次rt-pcr,做之前,用trizol法提的RNA ,RNA 的260/280 值都在1.8~2.0 之间,用的toyobo的反转录试剂盒反转,之后上样跑pcr,可是PCR的结果总是有问题,主要问题如下: A、B、C 三组,每组各设三个复孔(A1A2A3 B1B2B3 C1C2C3)各复孔之间,有一个往往孔比其他两孔,目的基因表达水平要高,ct值 另外两个孔要低一般都早两个循环~但actin的ct值每孔之间差异不大。例如:目的基因A1>A2A3(A2A3大致相同),Ct值:A1
[
Last edited by 自己的滋味 on 2012-4-18 at 21:49
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1楼
2012-04-18 21:48:02
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fwks3518
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
混体系的时候统一加模板,才能保证结果的平行性。
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2楼
2012-04-19 08:59:44
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引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
fwks3518
at 2012-04-19 08:59:44:
混体系的时候统一加模板,才能保证结果的平行性。
关键是,并不是单一的模板啊,一个处理组在铺板时,铺的就是3个复孔,所以经过提rna,反转后,就是三个模板,即A1A2A3,怎么混一块?
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3楼
2012-04-19 23:07:37
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fwks3518
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专业: 微生物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★
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★
有帮助, 谢谢
2012-04-23 10:43:40
引用回帖:
3楼
:
Originally posted by
自己的滋味
at 2012-04-19 23:07:37:
关键是,并不是单一的模板啊,一个处理组在铺板时,铺的就是3个复孔,所以经过提rna,反转后,就是三个模板,即A1A2A3,怎么混一块?
同一个模板混体系,三个模板混3个体系
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4楼
2012-04-21 11:07:34
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