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rt-pcr 复孔之间的目的基因表达不均问题
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做了多次rt-pcr，做之前，用trizol法提的RNA ,RNA 的260/280 值都在1.8~2.0 之间，用的toyobo的反转录试剂盒反转，之后上样跑pcr，可是PCR的结果总是有问题，主要问题如下： A、B、C 三组，每组各设三个复孔（A1A2A3 B1B2B3 C1C2C3）各复孔之间，有一个往往孔比其他两孔，目的基因表达水平要高，ct值 另外两个孔要低一般都早两个循环~但actin的ct值每孔之间差异不大。例如：目的基因A1>A2A3（A2A3大致相同），Ct值：A1 [ Last edited by 自己的滋味 on 2012-4-18 at 21:49 ] |
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