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1楼2013-08-15 11:26:07

chlorella409

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目测有可能是降解了

2楼2013-08-15 13:49:16

susan_lulu

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引用回帖:

2楼: Originally posted by chlorella409 at 2013-08-15 13:49:16
目测有可能是降解了

我是刚P完就进行酶切了，没有过夜，这样也会降解吗

3楼2013-08-15 15:26:58

chlorella409

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susan_lulu: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-08-19 16:17:59
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引用回帖:

3楼: Originally posted by susan_lulu at 2013-08-15 15:26:58
我是刚P完就进行酶切了，没有过夜，这样也会降解吗...

因为你是30度酶切的，温度较高，如果管子不干净或者操作不当会从外界带入核酸酶，一般用限制性内切酶都是16度酶切，时间延长

4楼2013-08-19 10:37:47

跳舞的骆驼

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-08-19 17:09:24

酶切的温度是37度，一般酶的说明书中有交待的。另外，PCR产物酶切肯定没有质粒酶切的好，出现了弥散现象很正常的，我以前也是这么偷懒作的，胶回收后得到的片断，再进行连接转化，得到的转化子比正常的少得多，不过可以省去很多步骤。

5楼2013-08-19 12:33:21

susan_lulu

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刚仔细看过，我买的SmaI说明书中写的最适温度是25度，改天用25度切切试试，估计弥散可能就会不出现了，谢谢楼上的两位

6楼2013-08-19 16:17:35

双鱼座的瓶盖

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酶切时候跑胶用的是什么浓度的胶？多大电压，多长时间？

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7楼2016-06-15 09:04:14