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susan_lulu

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切后电泳条带发生了弥散

各位虫友,我用Sma I酶切PCR产物,30度切了2小时,结果产物跑完电泳后发现条带发生了弥散,请问是什么原因呢?上图是酶切前产物电泳,下图是酶切后的产物电泳图。
酶切后电泳条带发生了弥散
川贝母20130723(特异引物,未酶切)57度.jpg


酶切后电泳条带发生了弥散-1
川贝母20130723(特异引物,酶切)57度.jpg
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跳舞的骆驼

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
susan_lulu: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-19 16:18:09
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-08-19 17:09:24
酶切的温度是37度,一般酶的说明书中有交待的。另外,PCR产物酶切肯定没有质粒酶切的好,出现了弥散现象很正常的,我以前也是这么偷懒作的,胶回收后得到的片断,再进行连接转化,得到的转化子比正常的少得多,不过可以省去很多步骤。
5楼2013-08-19 12:33:21
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