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汕头大学海洋科学接受调剂
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huakaihuaxie

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助DNA弥散状什么原因

CTAB提取的植物DNA,用的研磨仪破碎,检测的OD值260/280基本在2.01,260/230大于2,浓度为110ng左右,但是跑1%的胶检测就如图,请大家帮忙分析一下原因
求助DNA弥散状什么原因
eric 2013-08-06 11hr 42min.jpg
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huakaihuaxie

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-07 21:56:33
LZ确定加了RNA酶处理吗?有可能是讲解的RNA,而你的gDNA含量很低

没有加RNA,今天PCR了一下,P出来了,所以跑不出来就算了
9楼2013-08-08 22:57:22
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
huakaihuaxie: 金币+2 2013-08-08 22:56:37
是新鲜组织么? 好像是DNA降解了。
但是我没用过研磨仪,不知道这一步骤会不会造成gDNA的片段化呢?
2楼2013-08-06 15:20:56
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该从模板、引物、扩增体系等方面找原因;例如模板不纯、引物特异性不高、酶量过大、Mg++过高、退火温度低、dNTP过多等等
3楼2013-08-06 16:44:02
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huakaihuaxie

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-08-06 15:20:56
是新鲜组织么? 好像是DNA降解了。
但是我没用过研磨仪,不知道这一步骤会不会造成gDNA的片段化呢?

不是新鲜材料,是去年采集的,但是用硅胶干燥而且在-80的冰箱中保存了的。今天用试管中研磨看看行不行
4楼2013-08-06 18:24:58
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