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hebeilibing1

金虫 (正式写手)

[交流] 求助:基因组DNA电泳无明显条带,成弥散状 已有7人参与

这是从放线菌中提取的基因组DNA,电泳图,请大家帮忙分析一下,是什么原因。

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-28 17:25:32
没消化RNA吧。此外,点样孔发亮,说明有蛋白DNA复合体。消化掉RNA,再除蛋白杂质。
3楼2013-03-13 14:27:13
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普通回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
marker是多大的?感觉被降解了
2楼2013-03-13 13:57:00
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东方龙飞

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
还有可能的原因,在于你是放线菌,而有很多放线菌可能会有DNA硫修饰,这样在跑胶点时候,就会发生弥散状
4楼2013-03-13 16:34:53
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hebeilibing1

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-13 13:57:00
marker是多大的?感觉被降解了

嗯,是帮别人求助的,我问一下marker大小,有可能是降解了,另外他们提取的过程中将DNA加入异丙醇析出时用的枪头没有剪过,是否会把DNA链弄断了。
5楼2013-03-13 18:30:52
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hebeilibing1

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-13 14:27:13
没消化RNA吧。此外,点样孔发亮,说明有蛋白DNA复合体。消化掉RNA,再除蛋白杂质。

嗯,提取过程中是没有消化RNA的步骤,请教一下,是否一定要加入RNase呢?
6楼2013-03-13 18:32:07
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hebeilibing1

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 东方龙飞 at 2013-03-13 16:34:53
还有可能的原因,在于你是放线菌,而有很多放线菌可能会有DNA硫修饰,这样在跑胶点时候,就会发生弥散状

哦,这个还真不太了解,多谢,我再查查相关的资料。
7楼2013-03-13 18:32:41
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by hebeilibing1 at 2013-03-13 18:32:07
嗯,提取过程中是没有消化RNA的步骤,请教一下,是否一定要加入RNase呢?...

是的。不加RNase的话,新提的DNA样品里会有很多RNA。不过,因为RNA不稳定,即使放在-20°C,过一段时间也会慢慢降解掉的。
8楼2013-03-14 05:05:40
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xulu17

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
点样孔有蛋白DNA复合体,RNA未消化,切胶回收DNA!
9楼2013-03-14 08:40:26
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mangmanglulu

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by xulu17 at 2013-03-14 08:40:26
点样孔有蛋白DNA复合体,RNA未消化,切胶回收DNA!

我也有这样的情况,但是DNA条带不明显,怎么切胶回收啊??求指点
10楼2013-03-14 09:03:51
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