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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：基因组DNA电泳无明显条带，成弥散状
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hebeilibing1

金虫 (正式写手)

[交流] 求助：基因组DNA电泳无明显条带，成弥散状已有7人参与

这是从放线菌中提取的基因组DNA，电泳图，请大家帮忙分析一下，是什么原因。

未命名.jpg
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1楼2013-03-13 13:44:49
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-04-28 17:25:32
没消化RNA吧。此外，点样孔发亮，说明有蛋白DNA复合体。消化掉RNA，再除蛋白杂质。
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3楼2013-03-13 14:27:13
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
marker是多大的？感觉被降解了
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2楼2013-03-13 13:57:00
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东方龙飞

铜虫 (正式写手)
★
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还有可能的原因，在于你是放线菌，而有很多放线菌可能会有DNA硫修饰，这样在跑胶点时候，就会发生弥散状
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4楼2013-03-13 16:34:53
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hebeilibing1

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-13 13:57:00
marker是多大的？感觉被降解了

嗯，是帮别人求助的，我问一下marker大小，有可能是降解了，另外他们提取的过程中将DNA加入异丙醇析出时用的枪头没有剪过，是否会把DNA链弄断了。
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5楼2013-03-13 18:30:52
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hebeilibing1

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-13 14:27:13
没消化RNA吧。此外，点样孔发亮，说明有蛋白DNA复合体。消化掉RNA，再除蛋白杂质。

嗯，提取过程中是没有消化RNA的步骤，请教一下，是否一定要加入RNase呢？
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6楼2013-03-13 18:32:07
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hebeilibing1

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 东方龙飞 at 2013-03-13 16:34:53
还有可能的原因，在于你是放线菌，而有很多放线菌可能会有DNA硫修饰，这样在跑胶点时候，就会发生弥散状

哦，这个还真不太了解，多谢，我再查查相关的资料。
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7楼2013-03-13 18:32:41
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by hebeilibing1 at 2013-03-13 18:32:07
嗯，提取过程中是没有消化RNA的步骤，请教一下，是否一定要加入RNase呢？...

是的。不加RNase的话，新提的DNA样品里会有很多RNA。不过，因为RNA不稳定，即使放在-20°C，过一段时间也会慢慢降解掉的。
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8楼2013-03-14 05:05:40
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xulu17

铜虫 (初入文坛)
★
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点样孔有蛋白DNA复合体，RNA未消化，切胶回收DNA！
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9楼2013-03-14 08:40:26
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mangmanglulu

金虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by xulu17 at 2013-03-14 08:40:26
点样孔有蛋白DNA复合体，RNA未消化，切胶回收DNA！

我也有这样的情况，但是DNA条带不明显，怎么切胶回收啊？？求指点
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10楼2013-03-14 09:03:51
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