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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】垂直电泳扩散求助
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轩辕十四880

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】垂直电泳扩散求助

请教各位前辈一个问题：我做page胶电泳，用北京六一仪器厂的，可以点四层以上的PCR产物，银染后，为什么每次下面几层电泳条带都没了，或者变得非常模糊，我想是不是因为扩散了。我用的2000v电压、100w功率，电泳时间大概三个小时。
各位前辈大侠谁能给我点建议？不胜感激！
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1楼 2010-08-13 16:00:31
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★
轩辕十四880(金币+1):谢谢参与
轩辕十四880(金币+1): 2010-08-13 22:20:44
引用回帖:
Originally posted by 轩辕十四880 at 2010-08-13 16:00:31:
请教各位前辈一个问题：我做page胶电泳，用北京六一仪器厂的，可以点四层以上的PCR产物，银染后，为什么每次下面几层电泳条带都没了，或者变得非常模糊，我想是不是因为扩散了。我用的2000v电压、100w功率，电泳时 ...

不懂帮顶~~~
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小木虫之有关部门负责人
2楼2010-08-13 18:41:51
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hyw1989960

木虫 (正式写手)

快乐家族二十八
★
轩辕十四880(金币+1):谢谢参与
轩辕十四880(金币+1): 2010-08-13 22:20:37
应该是胶的问题，你把药品重配一下，缓冲液PH值要准，注意要胶凝的时间尽量长一些，一般过夜，
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快乐家族
3楼2010-08-13 19:12:37
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zhangchuo902
★
轩辕十四880(金币+1):谢谢参与
lstt09nk:不要纯表情发帖！ 2010-08-16 20:47:00
4楼2010-08-13 20:53:57
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
轩辕十四880(金币+1):谢谢参与
轩辕十四880(金币+1): 2010-08-13 22:21:02
是银染么？染色完水洗的时间控制的怎么样？

你的胶多长？条带多大？小条带2000V，3h的话跑得很远
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5楼2010-08-13 21:09:12
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飞天小肥猪

木虫 (小有名气)
★
轩辕十四880(金币+1):谢谢参与
我感觉电泳时间太长了
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6楼2010-08-13 22:32:17
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轩辕十四880

银虫 (初入文坛)
380mm长，260mm或380mm宽，2000v应该没问题，有么有可能是时间太长太热的原因？可是没有三个小时不能跑到下面啊，也就不能点四层样品了，那要那么大的玻璃有什么用呢

[ Last edited by 轩辕十四880 on 2010-8-14 at 00:04 ]
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7楼2010-08-14 00:00:19
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gaowei706

铁杆木虫 (职业作家)

资深潜水者
★
轩辕十四880(金币+1):谢谢参与
片段小，电泳时间长都会造成条带扩散
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逐渐失去棱角
8楼2010-08-14 07:36:19
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轩辕十四880

银虫 (初入文坛)
谢谢各位了，我找到原因了，是我跑的太久了，而且那些片段都很小。今天我只跑了一个半小时，所有的引物都出来了。
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9楼2010-08-16 20:05:07
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