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houzhidao

铜虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量溶解曲线前部分不平是什么原因?

我做的染料法的荧光定量PCR,这个溶解曲线的前面凹凸不平,不知道是什么原因造成的,应该从哪些方面改变吗?谢谢!
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  • 2013-07-15 16:07:01, 1.14 M

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坚持!改变!
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简单简易

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-20 11:11:56
总的来说这样的峰图不会影响结果分析的,
我猜想溶解曲线的前面凹凸不平可能是仪器的原因吧

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-07-20 09:40:34
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
houzhidao(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩 2013-07-20 11:11:39
houzhidao: 金币+4, ★★★很有帮助, 非常感谢您的帮助! 2013-07-29 12:47:35
最有可能的是你的引物设计有问题,引物可能有二聚体或错配
不过从峰形上看,对结果的影响倒是不大,但是你这种引物做荧光定量理论上是不合格的。
楼主也可以做个阳性对照或者其他基因的对照,若仍然出现这个问题,则可能是机器或试剂的问题
3楼2013-07-20 10:53:20
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houzhidao

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 简单简易 at 2013-07-20 09:40:34
总的来说这样的峰图不会影响结果分析的,
我猜想溶解曲线的前面凹凸不平可能是仪器的原因吧


非常感谢您的帮助!
坚持!改变!
4楼2013-07-29 12:48:36
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