24小时热门版块排行榜    

查看: 1451  |  回复: 4

wwling

铜虫 (小有名气)


[求助] 请教荧光定量软件溶解曲线smooth功能的问题

用的是伯乐的机子,软件是Opticon Monitor,其中溶解曲线有一项为Smooth。做定量不调Smooth时,溶解曲线前面有许多小峰,稍微调一下就变平滑的单峰了。不知道这个smooth调整过后的结果可用吗?另外那些杂峰是什么呢?电泳产物结果是单一的条带,觉得不像非特异条带吧,如何消除呢?求解啊!~~~~~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wwling(金币+1): 谢谢哦 嘿嘿 2011-05-14 19:38:55
1.是不是非特异性产物:上荧光图,凝胶图没用。~~~
2.每一家定量PCR的数据收集后都是经过数学处理的,smooth后自然可以用。
   不过没有文章会看你的这个原始峰。
2楼2011-05-14 12:15:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwling

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by adslye at 2011-05-14 12:15:54:
1.是不是非特异性产物:上荧光图,凝胶图没用。~~~
2.每一家定量PCR的数据收集后都是经过数学处理的,smooth后自然可以用。
   不过没有文章会看你的这个原始峰。

没调和调整过的溶解曲线
不知道为什么这个多杂峰呢 是不是都是非特异带?
3楼2011-05-14 13:54:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wwling at 2011-05-14 13:54:35:
没调和调整过的溶解曲线
不知道为什么这个多杂峰呢 是不是都是非特异带?

我看了你的图,没问题的。
因为看原始曲线,是一条有正常荧光信号降低的溶解曲线,但就是线上有些凹凸。好比一条不平的路。然而,将这个原始数据取对数后,这些小的数据浮动会产生较大的峰。这是数学换算造成的。不是说你的产物有那么多峰。

只能说伯乐的机子直接将原始荧光信号采集而未做过多加工就上图了。。。。
其实你能想到,每个温度下都是一个双链的降解和合成的平衡。既有解链又有结合。
这就可能造成少量的双链产物数量的起伏。用SYBR GREEN就和直接的反映了这个
现象而造成不平的曲线。用TEq MAN应该会好些。
4楼2011-05-15 10:40:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwling

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by adslye at 2011-05-15 10:40:06:
我看了你的图,没问题的。
因为看原始曲线,是一条有正常荧光信号降低的溶解曲线,但就是线上有些凹凸。好比一条不平的路。然而,将这个原始数据取对数后,这些小的数据浮动会产生较大的峰。这是数学换算造成 ...

谢谢指点啊~~受益了
5楼2011-05-15 13:08:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wwling 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +5 陌の森林 2026-03-18 5/250 2026-03-18 22:18 by bingxueer79
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +8 SUICHILD 2026-03-12 8/400 2026-03-18 20:55 by winsuccess
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +10 yangfz 2026-03-17 10/500 2026-03-18 20:14 by walc
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见