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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量溶解曲线前部分不平是什么原因？
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houzhidao

铜虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量溶解曲线前部分不平是什么原因？

我做的染料法的荧光定量PCR，这个溶解曲线的前面凹凸不平，不知道是什么原因造成的，应该从哪些方面改变吗？谢谢！
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    • 2013-07-15 16:07:01, 1.14 M

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坚持!改变！
1楼 2013-07-15 16:08:36
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简单简易

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-20 11:11:56
总的来说这样的峰图不会影响结果分析的，
我猜想溶解曲线的前面凹凸不平可能是仪器的原因吧
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houzhidao
2楼2013-07-20 09:40:34
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
houzhidao(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-20 11:11:39
houzhidao: 金币+4, ★★★很有帮助, 非常感谢您的帮助！ 2013-07-29 12:47:35
最有可能的是你的引物设计有问题，引物可能有二聚体或错配
不过从峰形上看，对结果的影响倒是不大，但是你这种引物做荧光定量理论上是不合格的。
楼主也可以做个阳性对照或者其他基因的对照，若仍然出现这个问题，则可能是机器或试剂的问题
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3楼2013-07-20 10:53:20
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houzhidao

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 简单简易 at 2013-07-20 09:40:34
总的来说这样的峰图不会影响结果分析的，
我猜想溶解曲线的前面凹凸不平可能是仪器的原因吧


非常感谢您的帮助！
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坚持!改变！
4楼2013-07-29 12:48:36
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