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DNA提取过程中的RNA消化
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bolomeer
铜虫
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虫号: 1408640
[交流]
DNA提取过程中的RNA消化
大家好,大家在需要避免RNA干扰的DNA提取过程中通常有多大浓度的RNase A,处理条件和时间是怎样的?我通常用2.5ng/ul的浓度,37度处理1小时,有时去不干净,影响下游检测,但是时间长了又怕把DNA也降解掉,请问有没有更好的条件。
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2013-06-22 11:01:55
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Science298
铜虫
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★
bolomeer(金币+1): 谢谢参与
1949stone: sure吗???
2013-06-24 08:08:22
对着每个管子哈口气就足够了。
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4楼
2013-06-23 19:37:08
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dcb005
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★ ★
bolomeer(金币+1): 谢谢参与
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer.
2013-06-22 16:52:59
10 mg/ml,加入4ul 到一个1.5ml tube里,也就是一个反应体系用4ul
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2楼
2013-06-22 12:00:59
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cicelyzh
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bolomeer(金币+1): 谢谢参与
1949stone: 回帖置顶
2013-06-24 08:07:59
RNase的用量取决于样品量的多少,我一般情况下~0.5 μg/μg DNA。用的是DNase-free的RNase,应该不会把DNA降解的。而且一般情况下DNA比RNA要稳定,不加入DNase的话DNA不会那么容易被降解掉的。
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3楼
2013-06-22 17:20:24
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Science298
铜虫
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虫号: 519728
如果楼主提取RNA是做分子标记或者芯片的话,没有必要在意RNA残留,要晓得RNAase无处不再且超级难以灭火(有兴趣的可以去尝试提取一下RNA),所以个人且以为正常呼吸就足够了。
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5楼
2013-06-24 08:41:45
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