应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA是直接加Trizol还是胰酶消化后加Trizol？
211/1返回列表
查看: 7257  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[交流] 提取RNA是直接加Trizol还是胰酶消化后加Trizol？

本人最近在做从哺乳动物细胞中提取RNA，细胞是贴壁生长的，以往提取的时候是先用胰酶消化收集细胞后再加入TRizol，原来细胞培养瓶的底面积是3.5平方厘米，但是加入Trizol的量是1ml，因为细胞的数目在700万左右，结果提取效果一般，但是做RT-PCR也可扩增出目的基因。最近要在六孔板中做，依据大家的经验，是直接加Trizol提取RNA效果好还是胰酶消化细胞后提取RNA的效果后，请有经验的朋友帮助解答一下，资源共享，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-10-08 12:43:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jyjydd at 2012-10-08 13:12:23

，对您感到很遗憾
回复此楼
5楼2012-10-08 13:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dajiong

金虫 (正式写手)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
其实培养瓶里可以不用消化直接加trizol就能做的。反正细胞都会裂解掉。所以六孔板我认为应该也不需要加胰酶。
赞一下 回复此楼
6楼2012-10-08 23:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
PBS洗两次后直接加trizol
赞一下 回复此楼
7楼2012-10-09 09:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qszxmc

铜虫 (小有名气)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
祝贺

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
8楼2012-10-09 10:21:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangxl

金虫 (著名写手)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
我是直接加trizol，没消化过，觉得消化好像是多此一举。
赞一下 回复此楼
9楼2012-10-09 10:23:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
我先消化一下，装到EP管中，然后再加Trizol，效果也很好
赞一下 回复此楼
10楼2012-10-09 19:58:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dajiong at 2012-10-08 23:10:48
其实培养瓶里可以不用消化直接加trizol就能做的。反正细胞都会裂解掉。所以六孔板我认为应该也不需要加胰酶。

谢谢啊！
回复此楼
11楼2012-10-10 15:14:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by jl860822 at 2012-10-09 19:58:48
我先消化一下，装到EP管中，然后再加Trizol，效果也很好

恩 我的同学也是这样子做的，结果也是很好！ 我还是放在六孔板里做吧，谢谢了！！
赞一下 回复此楼
12楼2012-10-10 15:15:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dajiong at 2012-10-08 23:10:48
其实培养瓶里可以不用消化直接加trizol就能做的。反正细胞都会裂解掉。所以六孔板我认为应该也不需要加胰酶。

恩，谢谢解答！
回复此楼
14楼2012-10-10 15:18:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sxxuan at 2012-10-09 09:08:54
PBS洗两次后直接加trizol

，打算采用您的方法试一试
赞一下 回复此楼
15楼2012-10-10 15:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by czcpudai at 2012-10-10 15:15:23
恩 我的同学也是这样子做的，结果也是很好！ 我还是放在六孔板里做吧，谢谢了！！...

只要细胞不死就OK，RNase就不会起作用，而消化的时候细胞是不会死的，所以不会对RNA有影响的
赞一下 回复此楼
16楼2012-10-10 15:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy_rebecca

新虫 (初入文坛)
★ ★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-10 19:30:52
这么小的瓶子，trizol量可以减少，就是6孔板的话，500μl也够了，不建议6孔板，据我们实验室老师们以前的经验，板子提RNA比较容易降解，所以我也没用板子提过，而且一次同时提取量不要超过4瓶，否则也易降解
赞一下 回复此楼
17楼2012-10-10 17:04:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xlblank

新虫 (正式写手)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
xlblank回复
回复此楼
18楼2012-10-10 19:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dajiong

金虫 (正式写手)
干嘛要谢两次。。。
回复此楼
19楼2012-10-10 19:53:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古贝壳

新虫 (初入文坛)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
您好，我是用qiagen试剂盒的裂解液裂解细胞的，只在培养瓶里静置了两分钟，提出来rna的浓度很低，请问是和裂解时间短有关系吗？但是说明书上也没有写静置时间？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
20楼2017-03-21 09:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蔚蓝97

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
pbs洗去培养基后直接加trizol就可以了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
21楼2017-03-21 17:55:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yaland2楼
2012-10-08 12:57   回复  
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
jyjydd3楼
2012-10-08 13:12   回复  
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
czcpudai4楼
2012-10-08 13:50   回复  
引用回帖:
2楼: Originally posted by yaland at 2012-10-08 12:57:19

czcpudai13楼
2012-10-10 15:15   回复  
引用回帖:
9楼: Originally posted by jiangxl at 2012-10-09 10:23:08 我是直接加trizol，没消化过，觉得消化好像是多此一举。

相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
211/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭