24小时热门版块排行榜    

查看: 7272  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)


[交流] 提取RNA是直接加Trizol还是胰酶消化后加Trizol?

本人最近在做从哺乳动物细胞中提取RNA,细胞是贴壁生长的,以往提取的时候是先用胰酶消化收集细胞后再加入TRizol,原来细胞培养瓶的底面积是3.5平方厘米,但是加入Trizol的量是1ml,因为细胞的数目在700万左右,结果提取效果一般,但是做RT-PCR也可扩增出目的基因。最近要在六孔板中做,依据大家的经验,是直接加Trizol提取RNA效果好还是胰酶消化细胞后提取RNA的效果后,请有经验的朋友帮助解答一下,资源共享,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy_rebecca

新虫 (初入文坛)


★ ★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-10 19:30:52
这么小的瓶子,trizol量可以减少,就是6孔板的话,500μl也够了,不建议6孔板,据我们实验室老师们以前的经验,板子提RNA比较容易降解,所以我也没用板子提过,而且一次同时提取量不要超过4瓶,否则也易降解
17楼2012-10-10 17:04:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

czcpudai

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by jyjydd at 2012-10-08 13:12:23

,对您感到很遗憾
5楼2012-10-08 13:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dajiong

金虫 (正式写手)



czcpudai(金币+1): 谢谢参与
其实培养瓶里可以不用消化直接加trizol就能做的。反正细胞都会裂解掉。所以六孔板我认为应该也不需要加胰酶。
6楼2012-10-08 23:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)



czcpudai(金币+1): 谢谢参与
PBS洗两次后直接加trizol
7楼2012-10-09 09:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
czcpudai4楼
2012-10-08 13:50   回复  
引用回帖:
2楼: Originally posted by yaland at 2012-10-08 12:57:19

czcpudai13楼
2012-10-10 15:15   回复  
引用回帖:
9楼: Originally posted by jiangxl at 2012-10-09 10:23:08 我是直接加trizol,没消化过,觉得消化好像是多此一举。

普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见