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czcpudai

铜虫 (正式写手)


[交流] 提取RNA是直接加Trizol还是胰酶消化后加Trizol?

本人最近在做从哺乳动物细胞中提取RNA,细胞是贴壁生长的,以往提取的时候是先用胰酶消化收集细胞后再加入TRizol,原来细胞培养瓶的底面积是3.5平方厘米,但是加入Trizol的量是1ml,因为细胞的数目在700万左右,结果提取效果一般,但是做RT-PCR也可扩增出目的基因。最近要在六孔板中做,依据大家的经验,是直接加Trizol提取RNA效果好还是胰酶消化细胞后提取RNA的效果后,请有经验的朋友帮助解答一下,资源共享,谢谢!
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sxxuan

金虫 (著名写手)



czcpudai(金币+1): 谢谢参与
PBS洗两次后直接加trizol
7楼2012-10-09 09:08:54
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查看全部 21 个回答

czcpudai

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by jyjydd at 2012-10-08 13:12:23

,对您感到很遗憾
5楼2012-10-08 13:50:24
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dajiong

金虫 (正式写手)



czcpudai(金币+1): 谢谢参与
其实培养瓶里可以不用消化直接加trizol就能做的。反正细胞都会裂解掉。所以六孔板我认为应该也不需要加胰酶。
6楼2012-10-08 23:10:48
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qszxmc

铜虫 (小有名气)



czcpudai(金币+1): 谢谢参与
祝贺

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2012-10-09 10:21:19
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czcpudai4楼
2012-10-08 13:50   回复  
引用回帖:
2楼: Originally posted by yaland at 2012-10-08 12:57:19

czcpudai13楼
2012-10-10 15:15   回复  
引用回帖:
9楼: Originally posted by jiangxl at 2012-10-09 10:23:08 我是直接加trizol,没消化过,觉得消化好像是多此一举。

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