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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA是直接加Trizol还是胰酶消化后加Trizol？
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[交流] 提取RNA是直接加Trizol还是胰酶消化后加Trizol？

本人最近在做从哺乳动物细胞中提取RNA，细胞是贴壁生长的，以往提取的时候是先用胰酶消化收集细胞后再加入TRizol，原来细胞培养瓶的底面积是3.5平方厘米，但是加入Trizol的量是1ml，因为细胞的数目在700万左右，结果提取效果一般，但是做RT-PCR也可扩增出目的基因。最近要在六孔板中做，依据大家的经验，是直接加Trizol提取RNA效果好还是胰酶消化细胞后提取RNA的效果后，请有经验的朋友帮助解答一下，资源共享，谢谢！
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1楼 2012-10-08 12:43:21
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
czcpudai(金币+1): 谢谢参与
我先消化一下，装到EP管中，然后再加Trizol，效果也很好
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10楼2012-10-09 19:58:48
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jl860822

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by czcpudai at 2012-10-10 15:15:23
恩 我的同学也是这样子做的，结果也是很好！ 我还是放在六孔板里做吧，谢谢了！！...

只要细胞不死就OK，RNase就不会起作用，而消化的时候细胞是不会死的，所以不会对RNA有影响的
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16楼2012-10-10 15:26:23
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