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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr产物电泳图
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)

[求助] pcr产物电泳图

请各位高手帮忙看一下，这是做的3'race，目的片段应该是456左右，电泳跑成这个样子，是有片段了么？为什么会出现拖尾、模糊的现象，是胶的问题么，重新制胶跑了一次还是这样，还是引物或模板加多了？是否可以回收了呢。。。急、急、急！谢谢各位！
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只为自己所要的幸福快乐
1楼 2013-05-17 09:36:07
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念碎碎

银虫 (正式写手)
图呢？
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2楼2013-05-17 09:47:49
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)
这是电泳图，左边第一个是maker 2000

未命名.jpg
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只为自己所要的幸福快乐
3楼2013-05-17 09:50:18
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 念碎碎 at 2013-05-17 09:47:49
图呢？

有图了，请指点一下吧
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只为自己所要的幸福快乐
4楼2013-05-17 09:55:17
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sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我很快乐3A87: 金币+1 2013-05-17 12:14:51
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-17 17:13:57
拖尾、模糊的现象第一有可能镁离子加的过多；第二种可能就是RNA没有除干净，拖尾的就是小分子的RNA片段，试着多加点RNA酶吧
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要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
5楼2013-05-17 09:58:30
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念碎碎

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我很快乐3A87: 金币+1 2013-05-17 12:15:54
我很快乐3A87: 金币+1 2013-05-17 12:19:42
gyesang: 金币+1, 鼓励发贴交流，为楼主问题解决提供可能的线索！ 2013-05-17 17:14:05
marker也很不清楚，我觉得可能是电泳的问题，胶浓度，电压，电泳液
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6楼2013-05-17 10:12:03
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sunnyboylg at 2013-05-17 09:58:30
拖尾、模糊的现象第一有可能镁离子加的过多；第二种可能就是RNA没有除干净，拖尾的就是小分子的RNA片段，试着多加点RNA酶吧

是反转cDNA就有问题了么，怎么还会有RNA呢
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只为自己所要的幸福快乐
7楼2013-05-17 12:15:43
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 念碎碎 at 2013-05-17 10:12:03
marker也很不清楚，我觉得可能是电泳的问题，胶浓度，电压，电泳液

那你觉得算p出来了吗？
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只为自己所要的幸福快乐
8楼2013-05-17 12:20:10
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我很快乐3A87: 金币+1 2013-05-17 15:28:49
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-17 17:14:14
感觉条带模糊应该是电泳问题，估计是缓冲液长时间没换或者配制有问题，导致电泳过程大量产热，温度升高使得条带不清晰。至于拖尾，应该考虑扩增特异性以及模板纯度两个方面。
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9楼2013-05-17 15:10:16
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by joan198108 at 2013-05-17 15:10:16
感觉条带模糊应该是电泳问题，估计是缓冲液长时间没换或者配制有问题，导致电泳过程大量产热，温度升高使得条带不清晰。至于拖尾，应该考虑扩增特异性以及模板纯度两个方面。

那你觉得可以直接回收了么，做了好多次了，新手不太会
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只为自己所要的幸福快乐
10楼2013-05-17 15:31:04
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