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PCR 换了体系老是跑不出来
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本人新手，扩的是人的DNA片段，大小是1400bp左右。10ul体系进行 PCR gradient，找到了退火温度，但换成50ul体系就扩不出来了，这样反复了三四次。后来换25ul的体系也扩不出来。后来我把水，酶，Buffer，dNTP，引物，DNA模板都换了新的，用25ul的体系跑梯度，结果还是没跑出来。不知道怎么回事啊，求助各位大神。 25ul体系：水：18.5ul; 10*Buffer: 2.5ul; dNTP 2ul; 引物：1ul; Taq酶：0.5ul；DNA：1ul. |
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