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长片段基因3.9K克隆不出来,求助
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生化与分子
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专业: 生物化学
[交流]
长片段基因3.9K克隆不出来,求助
已有34人参与
各位坛友好:
我最近在构建一个重组载体,目的基因片段3.9K,已经克隆了近两周了,使用的是普通Taq酶,一直没有克隆出来,请有经验的坛友帮忙出出主意,谢谢啦!
[
Last edited by silicare on 2014-2-18 at 08:53
]
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panda73
hy_sandra
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1楼
2013-03-09 10:43:19
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panda73
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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
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推荐使用Takara的Primestar 高保真,高扩增效率,我们实验室一直用这个酶
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3楼
2013-03-09 15:42:47
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cicelyzh
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虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学
★
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换个酶吧。虽然理论上普通taq可以P出来。再说,3.9kb的片段最好用高保真酶,否则出错了还要重新克隆。
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2楼
2013-03-09 11:18:24
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hy_sandra
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注册: 2013-03-07
专业: 神经发育、遗传、代谢相关
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如果是要?慕M織弄出這麼大的片段,除了酵素要好之外,溶解組織的效率也要好,還有當初我把微量作出的片段?哪z中挖出,再PCR一次, 產量就很多了,可用?斫嬞|體
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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科研是無止盡的
4楼
2013-03-09 16:06:52
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性别: GG
专业: 植物遗传学
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5楼
2013-03-09 18:49:44
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