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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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生化与分子

新虫 (初入文坛)

[交流] 长片段基因3.9K克隆不出来,求助 已有34人参与

各位坛友好:
    我最近在构建一个重组载体,目的基因片段3.9K,已经克隆了近两周了,使用的是普通Taq酶,一直没有克隆出来,请有经验的坛友帮忙出出主意,谢谢啦!

[ Last edited by silicare on 2014-2-18 at 08:53 ]
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匿名

用户注销 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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5楼2013-03-09 18:49:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换个酶吧。虽然理论上普通taq可以P出来。再说,3.9kb的片段最好用高保真酶,否则出错了还要重新克隆。
2楼2013-03-09 11:18:24
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panda73

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
推荐使用Takara的Primestar 高保真,高扩增效率,我们实验室一直用这个酶
3楼2013-03-09 15:42:47
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hy_sandra

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
如果是要?慕M織弄出這麼大的片段,除了酵素要好之外,溶解組織的效率也要好,還有當初我把微量作出的片段?哪z中挖出,再PCR一次, 產量就很多了,可用?斫嬞|體

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
科研是無止盡的
4楼2013-03-09 16:06:52
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