24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3680  |  回复: 43
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

生化与分子

新虫 (初入文坛)

[交流] 长片段基因3.9K克隆不出来,求助 已有34人参与

各位坛友好:
    我最近在构建一个重组载体,目的基因片段3.9K,已经克隆了近两周了,使用的是普通Taq酶,一直没有克隆出来,请有经验的坛友帮忙出出主意,谢谢啦!

[ Last edited by silicare on 2014-2-18 at 08:53 ]
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

137167741

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第一、换高保真的酶
第二、检测模板质量,做几个内参
第三、考虑引物设计问题
总有一天我要修改用户名。
10楼2013-03-10 10:36:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 44 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换个酶吧。虽然理论上普通taq可以P出来。再说,3.9kb的片段最好用高保真酶,否则出错了还要重新克隆。
2楼2013-03-09 11:18:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panda73

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
推荐使用Takara的Primestar 高保真,高扩增效率,我们实验室一直用这个酶
3楼2013-03-09 15:42:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hy_sandra

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
如果是要?慕M織弄出這麼大的片段,除了酵素要好之外,溶解組織的效率也要好,還有當初我把微量作出的片段?哪z中挖出,再PCR一次, 產量就很多了,可用?斫嬞|體

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
科研是無止盡的
4楼2013-03-09 16:06:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-03-27 5/250 2026-03-28 08:42 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 303求调剂 +7 安忆灵 2026-03-22 8/400 2026-03-27 11:46 by sanrepian
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +6 小小陈小小 2026-03-22 9/450 2026-03-26 15:58 by dick_runner
[考研] 081700 调剂 267分 +11 迷人的哈哈 2026-03-23 11/550 2026-03-26 15:41 by zzll406
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
信息提示
请填处理意见