应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物电泳调低啊异常
51/1返回列表
查看: 543  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

丸子龙

金虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物电泳调低啊异常

PCR后电泳条带异常，请大家帮忙分析一下可能原因，谢谢啦！
W$V}OQOZ({WZ61]N@C$4GG4.jpg(12.87KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DYEHDi-tUAQA4c2?p=130497
反应条件如下：
95℃： 1min
98℃： 10s
梯度56℃、58℃、60℃：15s
72℃：2min30s
30cycles
72℃  7min

[ Last edited by 丸子龙 on 2013-1-9 at 16:49 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-09 16:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

navy132

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你使用什么做的模板？我以前也遇到过这种情况，有可能是PCR反应的酶在反应过程中变性，造成的。你的片段多大，可以试着缩短延伸时间或者调低你的变性温度。98度，个人觉得太高了。
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-15 21:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上面那么亮是模板加多了吧，对模板定量了吗？一般PCR的模板用量在电泳时看不到的。此外，目的片段多大，用的什么酶？退火时间可以延长到30-45秒。
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-10 07:23:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

419893334

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有可能模板太多；有可能引物设计不合理；有可能核酸提取有问题，杂质太多，或是已经降解
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-15 15:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭