应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳图为什么有拖尾
51/1返回列表
查看: 5429  |  回复: 19
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liuyun076826

金虫 (初入文坛)

[求助] 电泳图为什么有拖尾

对目的片段切胶回收进行连接转化，挑单克隆，摇菌后用M13通用引物进行菌液PCR，退火温度设为55度，目的条带为1kb左右。电泳后发现有目的条带的拖尾非常严重，这是什么原因造成的？我电泳时的电压为90v，胶浓度约为1.5%。菌液在4度存放了3-4天，会有影响吗？麻烦高手帮忙分析一下。

胶图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-12-25 19:22:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyun076826

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by moshangchenx at 2012-12-25 20:20:09
个人感觉胶没制好，好的胶MARKER是不会有拖尾的，建议看一下marker说明书，是不是2%更合适

谢谢，我做胶没有严格称量控制，就是大约加的，做出来的胶挺硬的。
赞一下 回复此楼
10楼2012-12-26 08:40:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

moshangchenx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liuyun076826: 金币+1, ★有帮助 2012-12-26 14:43:14
个人感觉胶没制好，好的胶MARKER是不会有拖尾的，建议看一下marker说明书，是不是2%更合适
赞一下 回复此楼
科研无止境，我心成蹉跎
2楼2012-12-25 20:20:09
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mguo15

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liuyun076826: 金币+1, ★有帮助 2012-12-26 14:42:21
菌不会有问题！你是否模板DNA用的太多了，建议减少菌液试试。另外PCR产物上样也酌情减少。
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-25 20:32:24
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liuyun076826: 金币+1, ★有帮助 2012-12-26 14:42:29
可能原因：
1、退火温度偏低，导致非特异扩增增多；
2、模板量太高；

1kb的片段，1.0或1.2的胶就可以啦。上1kb的，我都用0.8.
赞一下 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
4楼2012-12-25 20:56:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭