24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lixilei1314

金虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 1272.9
帖子: 213
在线: 117.3小时
虫号: 1276794

[交流] 相对定量内参基因的Ct值

1，请教各位，我最近在做荧光定量，一直在纠结一个问题。就是要不要调整mRNA的初始浓度，让最终荧光定量结果的内参基因Actin的Ct值在各个组织中相差不大（貌似最好小于1个循环）？理论上应该是各个组织中Actin的Ct值时相似的吧。
2，小弟都已经做完了，当时没考虑这个问题，做出来的结果，发现Actin的Ct值在各个组织中差异挺大的，最大都到5个循环左右了。现在才又考虑到这个问题了。纠结死了。这样的结果可能会有一定的影响，但还能用不？
请各位不吝赐教！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

求助，QRT PCR 用不同内参结果差距很大已经有4人回复
nifH基因的定量PCR问题已经有9人回复
荧光定量PCR使用双内参，该如何处理数据？已经有11人回复
qRT-PCR结果计算方法已经有9人回复
qrt-pcr加cDNA的量，怎么加？已经有12人回复
细菌荧光定量PCR的内参已经有6人回复
求帮忙！！目的基因Ct值很高已经有8人回复
关于定量PCR做基因表达量的疑问已经有3人回复
荧光定量PCR中，结果内参基因的CT值有，但是目的基因的CT值没有，怎么办已经有20人回复
RT-PCR过程中内参基因CT值问题已经有6人回复
qPCR 内参差异大已经有4人回复
荧光定量数据分析已经有13人回复
没有内参基因，还能做RT-PCR吗已经有8人回复
real-time PCR 相对定量时找不到内参基因是不是就没法做？已经有4人回复
做荧光定量PCR,如果对照组的目的基因不表达,在采用2-△△Ct时怎么处理数据已经有6人回复
荧光定量pcr,以及内参基因的选择。已经有4人回复
关于qRT-PCR内参基因的验证已经有10人回复
实时荧光定量相对定量标准曲线的问题已经有10人回复
qRTPCR内参基因是不是每次都要做已经有10人回复
相对定量内参基因循环数的问题已经有18人回复
Realtime PCR 内参与目的基因问题已经有11人回复
相对定量测基因相对表达量，急啊！！！已经有4人回复
我们做荧光定量CT值有一个阈值线，这个阈值线可以手动调吗？已经有8人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2012-07-27 12:50:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

空谈误国

金虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 833
帖子: 427
在线: 70.9小时
虫号: 2558636

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by vickie20 at 2012-07-28 10:43:35
有的人说，RNA最好调一致再做定量，有的说反正做的是相对定量不需要调，这个……我也在纠结中。不过我老师让我把RNA调一致了再做。还有一个说法是，单个内参在各组织各时期并不是总是很稳定，所以要用两个内参……

请问你是怎么调一致的？比如，反转录时RNA都用1ug，之后rt-pcr用的CDNA都用0.1ul这就是调一致了吗？

赞一下