| 查看: 3159 | 回复: 10 | ||
[求助]
实时荧光定量 相对定量 标准曲线的问题
|
|
各位同仁： 我最近做相对定量，首先做标准曲线看内参和目的基因的扩增效率是否一致，在这个环节上一直无法突破。 问题是：我的cDNA以10倍梯度稀释了13个梯度，但是Ct值都很接近，都在19-21之间。我的体系是takela的，20ul mix10 上0.4 下0.4 模板1 水8.2 95° 30s 95°5s 60°30s 40个循环 用的是96孔板，先把mix和上下，水混匀分装后，再加模板。 mix用之前先颠倒混匀。 加样时避免气泡的产生。 我的cDNA是由天根的反转录试剂盒得来的，用5ug的总RNA反转录成50ul的体系。 请各位帮我分析一下原因吧！做了3周了，一直这样无进展，很苦闷！谢谢您的分享和帮助了~ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有164人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR ，条件优化
已经有13人回复
- 最近两次的荧光定量溶解曲线 有多个峰
已经有10人回复
- 荧光定量 相对定量 标准曲线的材料、公式
已经有3人回复
- 求解：实时荧光定量PCR奇峰
已经有18人回复
- 荧光定量sybrgreen染料荧光值大小的问题
已经有8人回复
- 求解：Taqman MGB实时荧光定量PCR空白对照组荧光信号很强怎么回事？
已经有10人回复
- 荧光定量PCR。。。求助求助
已经有17人回复
- 荧光PCR，想做标准曲线
已经有4人回复
- 荧光pcr标准曲线问题
已经有21人回复
- 荧光定量PCR标准曲线的建立
已经有3人回复
- 荧光定量PCR扩增效率怎么做？？？？我要被逼疯了
已经有17人回复
- 实时荧光定量的数据导出后怎么处理啊？
已经有17人回复
- 荧光定量曲线问题
已经有5人回复
- Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？
已经有7人回复
- 相对定量PCR求助
已经有16人回复
- 标准菌株建立荧光定量PCR的标准曲线
已经有5人回复
- 荧光定量需要3个重复样本吗
已经有12人回复
- real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗？
已经有4人回复
- 【求助/交流】相对定量可以不做标准曲线吗
已经有4人回复
2楼2013-03-21 12:53:17
3楼2013-03-21 13:37:10
4楼2013-03-21 17:09:12
5楼2013-03-21 17:29:48
6楼2013-03-21 17:31:41
我反正-信了
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2281.8
- 散金: 160
- 红花: 1
- 帖子: 217
- 在线: 157.9小时
- 虫号: 1370472
- 注册: 2011-08-17
- 性别: GG
- 专业: 水产养殖学
7楼2013-03-22 09:31:34
zhangqian082
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 565.4
- 散金: 10
- 红花: 4
- 帖子: 128
- 在线: 48.9小时
- 虫号: 1483650
- 注册: 2011-11-09
- 专业: 细胞衰老
8楼2013-03-22 12:08:22
9楼2013-03-26 11:36:40
10楼2013-03-27 10:00:32
